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caicaibao

新虫 (小有名气)

[求助] 肿瘤多细胞球培养

请教各位前辈,我最近在做MCF-7多细胞球的培养。用1.5%的琼脂糖(无血清培养基溶解后,高压灭菌)铺96孔板。接种密度是1000-4000个每孔,每孔琼脂糖体积50-100微升都试验过。但是,总是形成不了细胞球。偶尔形成过细胞球,形状也极其不规则,细胞间连接很松散。做了好几个月了,总是失败。养的最好的情况就是图片那种,但是也不能用啊。
请教各位前辈,能不能说下自己的经验,或者培养时的关键操作呢?例如:琼脂糖密度,铺板体积,细胞接种数量,换液频率,以及一些关键的操作手法。

我主要是,趁热将琼脂糖加入96孔板后,放凉,然后接种细胞。接种后,采用十字法,摇匀(十下左右吧)。然后就放入培养箱培养,3天后半量换液。接着就是隔天一次半量换液。跟文献的方法一样,就是形成不了细胞球。即使形成了也是很不规则的,不能用来做实验,发文章。
还望前辈赐教。

肿瘤多细胞球培养
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董雪1992

银虫 (小有名气)

您好,请问您细胞球培养出来了吗?
2楼2017-05-12 11:06:48
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GuoLeilei

新虫 (初入文坛)

不知道您现在养出来了吗,能否说下经验,我最近也在做这个实验
3楼2017-06-12 21:26:56
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眉叶丹砂

新虫 (初入文坛)

细胞接种后,放摇床摇5min,这样细胞会聚集在一起,然后放在培养箱,第二天大部分孔的细胞都会成团的,我是这么做的
4楼2018-03-15 15:42:32
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眉叶丹砂

新虫 (初入文坛)

你好,请问你后面做肿瘤球的相关实验吗?想跟你请教一些问题可以吗?
5楼2018-03-15 21:45:00
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漫步云端hk

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by GuoLeilei at 2017-06-12 21:26:56
不知道您现在养出来了吗,能否说下经验,我最近也在做这个实验

我也要做这个,请问您做的怎么样
6楼2018-06-20 14:32:17
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~天地一沙鸥~

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 眉叶丹砂 at 2018-03-15 08:45:00
你好,请问你后面做肿瘤球的相关实验吗?想跟你请教一些问题可以吗?

您好,可以加入一起交流嘛?
7楼2020-10-15 17:26:00
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LJJ920819

新虫 (初入文坛)

请问你做出来了吗?形成肿瘤球体不是粘在琼脂糖上吗?
8楼2021-02-24 15:59:06
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