应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教一个连接后双酶切验证的问题！！！
81/1返回列表
查看: 841  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 请教一个连接后双酶切验证的问题！！！

首先，载体大小是2.5kb左右，目的片段是1.5kb左右。
连接转化以后提质粒，电泳结果是4kb左右，说明已经连接成功。

接下来双酶切验证，预期结果是2.5kb、1.5kb各出现一个亮带。
但是我的结果却是4kb、2.5kb各出现一条带，1.5kb处没有带。

这是怎么回事？？？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-11-01 09:27:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
可能酶切不彻底
2.5的条带是不是比较淡而4kb的仍比较亮呢？
赞一下 回复此楼
2楼2008-11-01 16:23:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuyamei2980

★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-6 08:52
跑电泳时你可以用20ul试一下，我以前用10ul跑电泳没电带，后来用的量多一倍就有，分析原因可能是量少的原因，也可能不是，你不反试一下
赞一下(6人) 回复此楼
3楼2008-11-01 21:10:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

melodyxin

铜虫 (小有名气)
哦！
2.5条带和4条带亮度差不多的，我只是奇怪1.5k的为什么没出来，而2.5的却能出来？
赞一下 回复此楼
4楼2008-11-02 11:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

melodyxin

铜虫 (小有名气)
5楼2008-11-03 12:41:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-6 08:52
可能是量太少了

我也碰到了类似的问题
赞一下(6人) 回复此楼
____/\~~~/\,----(..)/\____//|(\|(^\/___\/\||__||__|-"
6楼2008-11-03 12:48:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerome711

银虫 (小有名气)
首先酶切不彻底，改善酶切体系。
赞一下 回复此楼
做懂得生活的人
7楼2008-11-03 17:38:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerome711

银虫 (小有名气)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-6 08:51
再次，好多载体构建好后并不会像T Easy一样能切出漂亮的目的条带，这是很正常的。主要是拷贝数不一样，加大上样量试试。
赞一下(6人) 回复此楼
做懂得生活的人
8楼2008-11-03 17:40:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 melodyxin 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 4/200 2026-11-15 07:12 by xSrQNSSjcgoX
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:44 by xSrQNSSjcgoX
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 7/350 2026-11-15 02:48 by xSrQNSSjcgoX
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 10/500 2026-11-15 02:15 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 7/350 2026-11-14 22:44 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 9/450 2026-11-13 11:02 by Equinoxhua
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 czAiolzR0IJC 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-12 09:21 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 4/200 2026-11-12 06:03 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:08 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-12 00:44 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭