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新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR,验证引物,溶解曲线出现蓝色和绿色的杂带,求大神帮忙解答

新手,没有做过荧光定量PCR
所有孔加的模板都一样
图1为内参
图2,3为2个基因:NF-kB TLR2(各做4个重复)
图4,5为TLR2两个重复,正常
图6 为TLR2一个重复为蓝色
图7 为TLR2一个重复为绿色

NF-kB只有一个正常,其余三个孔均为蓝色
先后做了好几次,无论设置4个重复,还是8个重复,都会发生这样的问题:出现蓝色和绿色的线

疑问:为什么会出现绿色和蓝色的线条,是目标基因表达量的问题吗??求大神帮忙解答,感激不尽

荧光定量PCR,验证引物,溶解曲线出现蓝色和绿色的杂带,求大神帮忙解答
内参溶解曲线


荧光定量PCR,验证引物,溶解曲线出现蓝色和绿色的杂带,求大神帮忙解答-1
NF-kB TLR


荧光定量PCR,验证引物,溶解曲线出现蓝色和绿色的杂带,求大神帮忙解答-2
NF-kB TLR溶解曲线


荧光定量PCR,验证引物,溶解曲线出现蓝色和绿色的杂带,求大神帮忙解答-3
TLR2两个重复,正常


荧光定量PCR,验证引物,溶解曲线出现蓝色和绿色的杂带,求大神帮忙解答-4
TLR2两个重复,正常


荧光定量PCR,验证引物,溶解曲线出现蓝色和绿色的杂带,求大神帮忙解答-5
TLR2一个重复为蓝色


荧光定量PCR,验证引物,溶解曲线出现蓝色和绿色的杂带,求大神帮忙解答-6
TLR2一个重复为绿色
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