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Anastasiav

新虫 (小有名气)

[交流] Sephadex G-50纯化问题,求指点 已有3人参与

背景:GE公司的Sephadex G-50填料装柱(柱体积约为700ml),上样13ml(c大约为11mg/ml),洗脱流速为450ul/min。
问题:G-50分离性能500-30000d,我需要分离28300d和17000d的两种蛋白,结果是大分子贯穿洗脱全程,小分子在中间洗脱出来,但都不是尖锐的峰,与预测不符合,自己又分析不出,之前做小样洗脱,流速130ul/min,也是同样的状况。
求大神们指点指点
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Anastasiav

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 麦子果树 at 2016-06-05 11:39:07
那你的内径大概是14mm的样子,配上1m的柱子,表面积是不是有点小了。你的样品浓度是1.1%,可以适当调小点(<0.5%)再试试。自己做的分子筛柱子,不能够控制压力,感觉流速有点慢。
希望对你有点帮助。...

柱子半径1.75cm 填料高度75cm

发自小木虫IOS客户端
7楼2016-06-06 14:02:09
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hc-material

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
建议你试一下G-75
或者试下其他层析,分子量相差并不大,不建议你使用分子筛。可以离子,或疏水。祝顺利
2楼2016-05-20 16:41:59
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Anastasiav

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2016-05-20 16:41:59
建议你试一下G-75
或者试下其他层析,分子量相差并不大,不建议你使用分子筛。可以离子,或疏水。祝顺利

首先经过离子柱层析之后,并未完全分离开,想进一步纯化,因此考虑分子筛。查阅文献是用分子筛即可分离开,这个方法不可行吗?
3楼2016-06-02 10:26:05
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麦子果树

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
柱体积700ml,请问一下,你的柱子是什么规格的?
4楼2016-06-04 12:51:50
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