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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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简简单单-婧

新虫 (小有名气)


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目的片段有p出来后割胶回收,载体也是酶切后跑电泳割胶回收!为什么做转化后挑了10多个克隆菌液pcr后都是载体自连!还需要再挑克隆呢还是重新做转化呢?大神,求解

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瘸腿老马

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
把该做的对照做全
最好用不同切点的酶做克隆
13楼2016-05-19 05:30:13
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简简单单-婧

新虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by yanglijuan at 2016-05-17 22:01:09

连接转化后都是载体自连,这正常吗?

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8楼2016-05-17 22:02:30
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6827089

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
做只有切好载体的连接,作对照,可能载体没切开

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9楼2016-05-17 22:08:00
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简简单单-婧

新虫 (小有名气)


引用回帖:
9楼: Originally posted by 6827089 at 2016-05-17 22:08:00
做只有切好载体的连接,作对照,可能载体没切开

喔喔,好的!谢谢!我明天下课试试!

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10楼2016-05-17 22:26:35
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杨子沫

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
载体可以用CIAP去磷,减少自连

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11楼2016-05-17 22:50:06
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瘸腿老马

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
8楼: Originally posted by 简简单单-婧 at 2016-05-17 22:02:30
连接转化后都是载体自连,这正常吗?
...

正常
12楼2016-05-19 05:27:08
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简简单单-婧

新虫 (小有名气)


引用回帖:
13楼: Originally posted by 瘸腿老马 at 2016-05-19 05:30:13
把该做的对照做全
最好用不同切点的酶做克隆

好的~

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14楼2016-05-19 23:26:04
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我会全部验证。pcr阳性对照做了吗?

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15楼2016-05-20 00:31:13
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werq63

金虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
十个都没有验证出来,还是重做吧,载体酶切时间长一点,注意双酶切粘性末端是不是相同

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16楼2016-05-22 13:35:44
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ShenY J

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
碱性磷酸酶防止载体自连

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17楼2016-05-22 14:35:14
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2016-05-17 22:00   回复  
简简单单-婧(金币+1): 谢谢参与
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2016-05-17 22:00   回复  
简简单单-婧(金币+1): 谢谢参与
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ha1ha14楼
2016-05-17 22:00   回复  
简简单单-婧(金币+1): 谢谢参与
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2016-05-17 22:00   回复  
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9520034986楼
2016-05-17 22:00   回复  
简简单单-婧(金币+1): 谢谢参与
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2016-05-17 22:01   回复  
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