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打哈欠的人

金虫 (正式写手)

[求助] 请各位大神指教!293细胞传代之后生长一直不匀,难道是我没摇匀?已有2人参与

最近在学习细胞培养,但是陷入了一个泥潭……

每次293细胞传代之后,第二天就能发现细胞很不匀,有的地方特别密,有的地方没细胞……

这是我的传代过程,希望大家帮忙找找原因:
吸出培养基,PBS冲洗,胰酶消化,拍打成单细胞,加培养基终止,离心弃上清,加少量培养基重悬,然后加到预先加了培养基的培养瓶里。最后——左手拿培养瓶瓶尾,右手拿瓶塞,以左右手连线为轴,晃几下.

1.大家都是怎么晃的呢?我也试过在离心管里先直接用足量培养基重悬细胞,然后上下颠倒混匀,直接加到培养瓶里,但是效果也不好。
2.除了“晃”,别的环节应该不会影响细胞生长的均匀度吧?

另外,我用T25的时候,不匀的情况会比T75更严重。

恳请大家帮忙分析一下,小问题,不要介意大材小用啦!
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zai__guan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

293目前就了解的,还不需要消化,细胞本身贴壁就不牢的,另外就是你培养293的时候如果觉得出现上述情况,建议你可以直接用枪头去吹
做好自己,影响他人
11楼2016-05-26 08:10:37
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