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刘烈奥

铜虫 (小有名气)

[求助] 制备色谱问题。谢谢大家帮帮忙。 已有2人参与

问题1:制备液相时纯甲醇冲洗柱子总是出现图片的状况(柱子是干净的)。什么原因?
问题2:分析HPLC出峰正常分离度很好,峰很多,换到制备上就在前5到6分钟就全部出来了。像是没有保留直接全部冲洗出来了,什么原因呢?如图(分析和制备洗脱条件一样就是流量大了3倍)

制备色谱问题。谢谢大家帮帮忙。


制备色谱问题。谢谢大家帮帮忙。-1


@学术巨星 @wyy080214 @klicking 发自小木虫IOS客户端
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wdw989

新虫 (正式写手)

我做高压制备的时候,流速是液相的十几到二十倍,因为走的是梯度,液相时间短梯度变化快,所以我制备的梯度会比液相小二十左右,比如液相百分之七十甲醇出峰,可能制备百分之四五十甲醇出峰

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4楼2016-05-16 13:31:31
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
图谱表达有气泡在检测器里,通常是水-甲醇系统。将水超声真空脱气5-10分钟,有时,甲醇超声脱气5分钟。至于制备柱的柱效肯定没有分析柱大,很常见在分析柱上保留时间较大,而制备柱上无保留,那就应该适当减少制备过程中的流动相极性。很多时候,靠经验,而不是靠什么软件,但是,溶剂的线速度是可以参考的。
7楼2016-05-16 15:35:48
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刘烈奥

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2016-05-16 15:35:48
图谱表达有气泡在检测器里,通常是水-甲醇系统。将水超声真空脱气5-10分钟,有时,甲醇超声脱气5分钟。至于制备柱的柱效肯定没有分析柱大,很常见在分析柱上保留时间较大,而制备柱上无保留,那就应该适当减少制备过 ...

减小流动相极性就是减小水比例,增加甲醇比例?

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9楼2016-05-16 18:30:07
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普通回帖

刘烈奥

铜虫 (小有名气)

2楼2016-05-16 11:41:18
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刘烈奥

铜虫 (小有名气)

3楼2016-05-16 13:01:27
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你好小玮

银虫 (正式写手)

多肽高手


5楼2016-05-16 13:56:54
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

检查一下压力是否随着跳。有可能单向阀漏,可以换新或超声清洗。

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6楼2016-05-16 14:30:33
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、看看检测器是否有气泡,或者去掉色谱柱接双通,如果还是这样就是检测器的问题。
2、分析型和制备型的方法不能等价置换的,因为不同的颗粒度,不同的内径,造成分离度的不同,或者说柱效的不同,故出峰时间可能提前。可以通过两个色谱柱的柱效或者塔板数得到一个系数,通过换算来置换方法。
8楼2016-05-16 16:30:29
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刘烈奥

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by superyeast at 2016-05-16 14:30:33
检查一下压力是否随着跳。有可能单向阀漏,可以换新或超声清洗。

没有这些问题。

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10楼2016-05-16 18:31:14
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