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蜗牛蓝蓝新虫 (初入文坛)
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多环芳烃降解菌的三亲本杂交
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利用三亲本杂交的方法将绿色荧光蛋白转入到目的菌假单胞菌中 ，供体菌和辅助菌均为大肠杆菌 ，做了将尽两个月，一直没筛选出阳性接合子，想请大神帮忙看一下哪里出问题了，在实验操作中有哪些注意事项，跪谢！ 具体的实验操作： 1、供体菌、辅助菌在LB培养液（含卡那）中培养过夜 2、受体菌在LB培养液（含氨卞）中培养过夜 3、用新鲜的无抗生素的Lb培养液将三种菌OD值调到1.0，然后按1:1:1的体积比混合，4000转离心5分钟，弃上清液，重新用新鲜LB洗涤三次 4、取100ul混合菌于5ml新鲜无抗生素的培养液中,30度170转 培养过夜 5、将共培养的菌液稀释到100000倍，取100ul涂布到含卡那和氨卞的LB平板上培养过夜，挑去单菌落于Lb中进行扩大培养 @天使托 发自小木虫IOS客户端 |
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