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15853830932

木虫 (小有名气)

[求助] TA连接

我的片段长3.3kb，有启动子。是在大肠里表达的一个基因。然后做TA克隆，总也长不出来。化转DH5a感受态。不知道是怎么回事啊，请各位指教

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If you shed tear when you miss the sun, you also miss the stars.
1楼 2016-05-12 08:51:36
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willzhuu

铁虫 (著名写手)
片段太长，连不上正常。看下你这个片段带有A尾吗？也可以联系试剂商换个好点的连接试剂盒。祝好。

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不求一鸣惊人，但求抛砖引玉。
2楼2016-05-12 09:39:22
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15853830932

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by willzhuu at 2016-05-12 09:39:22
片段太长，连不上正常。看下你这个片段带有A尾吗？也可以联系试剂商换个好点的连接试剂盒。祝好。

我是做的加A完后连接的。连接用的Takara 的T-19simple。酶为solusion I 。体系是solution I 5ul  T-19 0.5ul    Fragment 4.5ul。不知道还能不能改进

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If you shed tear when you miss the sun, you also miss the stars.
3楼2016-05-12 10:37:44
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willzhuu

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 15853830932 at 2016-05-12 10:37:44
我是做的加A完后连接的。连接用的Takara 的T-19simple。酶为solusion I 。体系是solution I 5ul  T-19 0.5ul    Fragment 4.5ul。不知道还能不能改进
...

不用太纠结，不行就换，也花不了几个钱，你的工作重点是下游。

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不求一鸣惊人，但求抛砖引玉。
4楼2016-05-12 11:07:09
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