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三叶草王

铁虫 (正式写手)

[求助] 求助Tagman探针

第一次用Taqman探针做Q-PCR,结果如图所示,请教大神,这是怎么回事啊,
流程master mix  2.5ul
       assay   mix   0.5ul
     DNA 10ng/ul   2ul




Q-PCR  95度   10min
       95度     15sec
        60度      6osec              40循环

求助Tagman探针
1111.png


求助Tagman探针-1
111112.png
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我很棒滴
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love_st

金虫 (著名写手)


什么问题
2楼2016-05-10 09:10:39
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三叶草王

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by love_st at 2016-05-10 09:10:39
什么问题

曲线不连贯,起点还很低
我很棒滴
3楼2016-05-10 09:15:04
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love_st

金虫 (著名写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 三叶草王 at 2016-05-10 09:15:04
曲线不连贯,起点还很低

你要看线性图,另外,你的模板浓度过低
4楼2016-05-10 09:45:53
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三叶草王

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by love_st at 2016-05-10 09:45:53
你要看线性图,另外,你的模板浓度过低...

不就一个这个图和溶解曲线吗
我很棒滴
5楼2016-05-10 12:53:15
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许彦

木虫 (正式写手)

6楼2016-05-11 05:54:36
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三叶草王

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 许彦 at 2016-05-11 05:54:36
什么机器,需要改成liner

Applied Biosystems®  7900  实时 PCR 仪
我很棒滴
7楼2016-05-11 14:12:42
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许彦

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 三叶草王 at 2016-05-11 14:12:42
Applied Biosystems®  7900  实时 PCR 仪...

可以改成线性的,我对这个机器不是跟熟悉,但是绝对可以,

发自小木虫Android客户端
8楼2016-05-11 16:18:35
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solomon7811

新虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-05-12 08:16:31
引用回帖:
5楼: Originally posted by 三叶草王 at 2016-05-10 12:53:15
不就一个这个图和溶解曲线吗...

taq man 是不能做溶解曲线的。一般扩增曲线的显示有两种方式,你的这种和一种取对数的,自己熟悉下软件界面

发自小木虫Android客户端
9楼2016-05-12 06:20:51
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三叶草王

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by solomon7811 at 2016-05-12 06:20:51
taq man 是不能做溶解曲线的。一般扩增曲线的显示有两种方式,你的这种和一种取对数的,自己熟悉下软件界面
...

请详细讲解,谢谢
我很棒滴
10楼2016-05-12 21:23:34
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