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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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cathy9452

金虫 (小有名气)

[求助] 转膜的问题 已有2人参与

请问110KD蛋白用150mA左右电流跑多长时间才能转膜成功?@hc-material
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ahbbgzrq

木虫 (小有名气)

我们转膜是恒流转膜,电压一百左右,转膜120min, 240KDa可以转成功。PvDF膜。

发自小木虫Android客户端
2楼2016-05-08 16:40:08
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cathy9452

金虫 (小有名气)

两小时试过大分子转不过去,70kD以下刚转过去

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-05-08 16:42:49
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tim052701

新虫 (正式写手)

4楼2016-05-09 07:39:15
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cathy9452

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by tim052701 at 2016-05-09 07:39:15
建议提高电流到260左右

260跑多久?

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-05-09 11:47:07
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tim052701

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cathy9452 at 2016-05-09 11:47:07
260跑多久?
...

2小时

发自小木虫Android客户端
6楼2016-05-09 12:51:55
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wochong

新虫 (小有名气)


只要在SDS-PAGE胶可见范围之内,也就是10kd-120KD之内,都可以进行Western blot检测,转膜条件100V60-70min左右,转不转的上,一是通过wb检测,看看有没有结果,而是染一下胶,看看在不在上面
7楼2016-05-09 17:58:39
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amwodifl

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

提高电压,延长时间,另外用高灵敏度的显色液。如Thermo Fisher的高灵敏显色液,曝光时间适当延长,会得到结果。如果怀疑没有转膜成功,染胶看看目的蛋白是不是大量存在胶上。
8楼2016-05-11 15:50:27
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水色12345621

新虫 (小有名气)

9楼2016-05-12 08:46:14
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huangwensh

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我们,半干转,15v45分钟,转的很好
10楼2016-05-12 14:19:31
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