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Ryoma1994

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC法测定原料药的含量,测定之前扫描波长时的溶剂与进样时的溶剂关系 已有2人参与

我要建立hplc法测定一个原料药的含量。测定之前需要用紫外扫描吸收波长,这时我用的溶剂,和后来用hplc法测定时所用的溶剂不一样会有影响吗?
我用hplc测定呋喃唏啶原料药的含量,紫外扫描时,先用60ml的DMF溶解样品,再加96%的乙醇稀释到刻度线(100ml),再用移液管取1ml到100ml容量瓶,加磷酸缓冲盐稀释到刻度线,用磷酸盐缓冲液做空白矫正。
hplc法测定时,我用的是乙腈溶解样品,而流动相为乙腈-水(磷酸调节ph4)。
请问这样做可以吗?两次溶剂用的不一样会有不同吗?谢谢

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Ryoma1994

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 繁夏 at 2016-05-07 09:47:13
你为啥是磷酸缓冲液?
...

当时没注意,只想到了最后稀释用的是磷酸缓冲液。。。现在正在用乙腈溶解准备重新扫描一下

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7楼2016-05-07 10:11:49
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繁夏

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Ryoma1994: 金币+5, 有帮助 2016-05-07 09:37:13
没有影响,你扫波长,扣过背景

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2楼2016-05-07 07:13:44
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月光晒谷

铜虫 (小有名气)

dmf很可能有影响,在某些溶剂中会发生红移,蓝移现象,导致最大吸收波长有变化。你再用乙腈溶解扫一下紫外比较看看。

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3楼2016-05-07 08:24:49
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Ryoma1994

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 繁夏 at 2016-05-07 07:13:44
没有影响,你扫波长,扣过背景

但是我空白矫正时只用磷酸缓冲液做了空白矫正。

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4楼2016-05-07 09:28:21
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