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蛋黄派

银虫 (小有名气)

[交流] 请教:紫外吸收光谱测定蛋白质浓度

我用紫外吸收测定蛋白浓度,但是溶液中还有一种最大吸收波长在260的物质,与280蛋白最大吸收峰很接近,这样误差会不会很大?
有没有好的解决办法呢?
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lchn18

金虫 (正式写手)


有爱的日子(金币+1,VIP+0):感谢您的应助,欢迎常来分析版:)
先全波长扫描一下纯蛋白质的整个谱图,该蛋白质的吸收谱图尽收眼底,你看一下除了280nm处的最大吸收峰,还有没有其他吸收较好的次强峰或肩平峰,可以选择没有干扰的次强峰作为最大吸收波长进行分析,这样就可以排除260的干扰。
[img=88,31]http://user.meizu.com/data/avatar/000/66/24/88_avatar_middle.jpg[/img]
4楼2008-10-29 22:51:06
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yuer63

木虫 (正式写手)

如果对蛋白的最大吸收没造成干扰就没问题,应该还是测定蛋白的.
2楼2008-10-29 12:20:54
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opq691

荣誉版主 (知名作家)

小木虫酱油店店主

优秀版主


佳怡(金币+1,VIP+0):感谢应助~~3Q~
有干扰,260nm好像是DNA的峰,你最好可以试试做个对照,做一下纯蛋白的。找个在260nm没有干扰的蛋白试试,然后看看这两个的差别就知道误差了
▄︻┳═一*▄︻┳═一*众里寻虫千百度,蓦然回首,虫在酱油坛深处!▄︻┳═一*▄︻┳═一*
3楼2008-10-29 12:24:36
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