应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 重组质粒总是筛不到阳性克隆，是否是引物的问题？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 1238  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liuwukang

新虫 (小有名气)

[交流] 重组质粒总是筛不到阳性克隆，是否是引物的问题？ 已有5人参与

我用酶切后的质粒做过对照，长出的菌落极少，也就是说质粒还是酶切比较彻底的，与目的片段了解后转化的平板菌落比较多，抗性平板也测试过抗生素没什么问题，现在比较怀疑是不是用的引物不合适，我直接用之前片段克隆的引物鉴定的，而这个引物之前用就觉得扩增效率不是很高，会不会是引物导致的PCR根本没成功所以没有阳性克隆？

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-05-05 23:13:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

娟恋幸福

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没切开的几率很大，我最近也是这样

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-05-05 23:52:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果有能用的通用引物，那就用吧 骚年
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
3楼2016-05-06 00:39:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2016-05-06 00:39:10
如果有能用的通用引物，那就用吧 骚年

手头上没有但我有可以用的通用引物序列，今天再试试吧不行就订上通用引物

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-05-06 09:42:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小威斯

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我感觉验证引物可能有问题，我还曾经有过聚合酶过期的问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-05-06 19:06:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小威斯 at 2016-05-06 19:06:02
我感觉验证引物可能有问题，我还曾经有过聚合酶过期的问题

今天实验成功了，原因暂时不管啦，哈哈

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2016-05-06 20:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍遥之乐缘

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
亲，可以试试酶切坚定，菌落PCR并不是唯一的鉴定方法！

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-05-08 23:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

llsllslls92

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
酶切鉴定好一点 PCR鉴定不大可靠

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-05-09 23:45:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuwukang 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +4 PolarBear11 2026-03-26 4/200 2026-03-26 23:32 by Linzejun
[考研] 材料学硕333求调剂 +6 北道巷 2026-03-24 6/300 2026-03-26 23:16 by 不吃魚的貓
[考研] 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-03-21 4/200 2026-03-26 20:38 by fmesaito
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 调剂推荐 +4 清酒714 2026-03-26 5/250 2026-03-26 17:49 by fmesaito
[考研] 315分求调剂 +5 26考研上岸版26 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:11 by laoshidan
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 299求调剂 +7 shxchem 2026-03-20 9/450 2026-03-25 10:41 by lbsjt
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 一志愿深大，0703化学，总分302，求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭