24小时热门版块排行榜    

查看: 1319  |  回复: 7

liuwukang

新虫 (小有名气)

[交流] 重组质粒总是筛不到阳性克隆,是否是引物的问题? 已有5人参与

我用酶切后的质粒做过对照,长出的菌落极少,也就是说质粒还是酶切比较彻底的,与目的片段了解后转化的平板菌落比较多,抗性平板也测试过抗生素没什么问题,现在比较怀疑是不是用的引物不合适,我直接用之前片段克隆的引物鉴定的,而这个引物之前用就觉得扩增效率不是很高,会不会是引物导致的PCR根本没成功所以没有阳性克隆?

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

娟恋幸福

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没切开的几率很大,我最近也是这样

发自小木虫Android客户端
2楼2016-05-05 23:52:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果有能用的通用引物,那就用吧 骚年
Let God do with it as He wills
3楼2016-05-06 00:39:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2016-05-06 00:39:10
如果有能用的通用引物,那就用吧 骚年

手头上没有但我有可以用的通用引物序列,今天再试试吧不行就订上通用引物

发自小木虫Android客户端
4楼2016-05-06 09:42:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小威斯

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我感觉验证引物可能有问题,我还曾经有过聚合酶过期的问题

发自小木虫Android客户端
5楼2016-05-06 19:06:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 小威斯 at 2016-05-06 19:06:02
我感觉验证引物可能有问题,我还曾经有过聚合酶过期的问题

今天实验成功了,原因暂时不管啦,哈哈

发自小木虫Android客户端
6楼2016-05-06 20:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍遥之乐缘

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
亲,可以试试酶切坚定,菌落PCR并不是唯一的鉴定方法!

发自小木虫IOS客户端
7楼2016-05-08 23:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

llsllslls92

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
酶切鉴定好一点 PCR鉴定不大可靠

发自小木虫Android客户端
8楼2016-05-09 23:45:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuwukang 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 8/400 2026-08-02 20:24 by 3VGOm6paSgqv
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 6/300 2026-08-02 20:21 by 3VGOm6paSgqv
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 12/600 2026-08-02 20:21 by drbart
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 9/450 2026-08-02 20:18 by 3VGOm6paSgqv
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 6/300 2026-08-02 20:14 by 3VGOm6paSgqv
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +11 archvillain 2026-08-02 13/650 2026-08-02 20:09 by symmetry
[基金申请] 微信指数没变化,科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 13/650 2026-08-02 20:04 by 3VGOm6paSgqv
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 17/850 2026-08-02 20:03 by 3VGOm6paSgqv
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 17/850 2026-08-02 19:58 by 3VGOm6paSgqv
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 8/400 2026-08-02 18:44 by ca3DVAx4OB19
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 8/400 2026-08-02 18:44 by ca3DVAx4OB19
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 8/400 2026-08-02 18:24 by ca3DVAx4OB19
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 20/1000 2026-08-02 18:04 by ca3DVAx4OB19
[基金申请] 准备明年的基金了 +7 Tide man 2026-07-27 7/350 2026-08-02 16:43 by gltch
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 15/750 2026-08-02 16:23 by jHcrHMhbKCFV
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +15 布布和一二 2026-07-30 21/1050 2026-08-02 10:56 by iaeyuan
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备? 50+3 kf2781974 2026-07-31 7/350 2026-08-02 07:59 by 88817753
[基金申请] 系统今天又提示维护了,估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[有机交流] 产物和副产物价值比较 30+4 小汤02 2026-07-27 5/250 2026-07-30 12:44 by czyzsu
信息提示
请填处理意见