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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 质粒用酶切切不开是怎么回事呀？
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一张七块的

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒用酶切切不开是怎么回事呀？ 已有3人参与

别的实验室的老师给的质粒，切他给的能切开，我自己导入感受态（TOP10 DH5α都用过）扩繁后提的质粒怎么也切不开
说明书上建议酶量的1,2,4倍都试过，失败
说明书上建议的时间的1,2,3倍以及过夜酶切都试过，失败
提质粒用的天根质粒小提试剂盒，最后一步改用dd水洗脱，也切不开
酶没有问题，切我另外一个质粒，1小时就切开了
质粒本身也没有问题，切原质粒也能切开
问题是我自己扩繁后，再提出来的质粒，就切不开了
有人遇到过这种情况吗？求大神解答。。。
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1楼 2016-05-01 17:45:53
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一张七块的

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sunqx at 2016-05-01 17:54:13
测序看看

测序是测什么的序列？我设计了一对引物检测这个质粒，跑出来的条带大小正常而且单一，但就是切不开。。。
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4楼2016-05-01 21:19:15
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普通回帖

sunqx

木虫 (著名写手)
测序看看

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2楼2016-05-01 17:54:13
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leisure93

新虫 (初入文坛)
长得菌跑过胶大小正确吗？最好去测序

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3楼2016-05-01 20:53:15
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sunqx

木虫 (著名写手)
测你提的质粒

发自小木虫Android客户端
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5楼2016-05-01 21:45:52
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
6楼2016-05-02 17:08:51
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匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
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7楼2016-05-03 09:24:44
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美丽的红红

新虫 (初入文坛)
提取质粒会使质粒变化吗？可以直接用提取的质粒测序吗？以前测序都是送的菌液

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8楼2016-05-03 22:26:49
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轩辕漪

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
9楼2016-05-04 00:18:56
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科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是甲基化了呢，最好问问原先质粒的来源菌，用原始菌株扩增。
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生物科学
10楼2016-05-04 09:43:45
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