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基因克隆的问题
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各位大神，我的问题描述如下： 首先我克隆的基因命名为080，通过转录组预测的ORF是：1.JPG 然后我设计引物如图中黄色和蓝色，进行基因克隆，得到的序列是：2.JPG 比较两个图可以看到，引物是有的，绿色部分是不一样的序列，而其他地方完全一致。 我对这部分绿色在NCBI上BLAST，发现也比对到了我所研究的转录因子家族。 然后我对克隆得到的序列寻找ORF，就得到了3.JPG的结果，好几个短短的ORF。 我现在进行的是在转录组序列的绿色部分设计正向引物，和之前的反向引物配对，看能不能扩出片段，在做后续打算。 其实这个克隆已经很久了，我重复了三遍，结果完全一致，真是蛋疼啊。 所以大神给我解释解释吧，在给我教教接下来怎么操作的建议，小弟在这里谢谢你们了。。。。  1.JPG  2.JPG  3.JPG |
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