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LV疯子LV

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
bxzc12345: 金币+5 2016-04-30 08:24:00
我觉得,做任何优化前,确认了这个菌的生长特性是关键。
可以先优化下培养条件,比如,温度,发酵液ph,培养周期等
11楼2016-04-29 13:32:03
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陕西棋子

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
bxzc12345: 金币+5 2016-04-30 08:23:46
发酵周期,接种菌龄,接种量,诱导时机,诱导温度都可以试试
糊涂虫......
12楼2016-04-29 22:54:53
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bxzc12345

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jackie在努力 at 2016-04-26 21:32:18
如果要做比较系统的可以先进行单因素的优化,通过PB实验找出影响显著因子进行响应面优化,当然更建议用当下比较流行的神经网络。
细菌的碳源主要有:甘油和一些常见的糖类物质
主要氮源有:不同规格的蛋白胨、不同 ...

请问诱导剂是什么?

发自小木虫IOS客户端
13楼2016-04-30 08:26:43
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a2703521

金虫 (小有名气)

123

【答案】应助回帖

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bxzc12345: 金币+8 2016-05-05 07:46:08
要优化的条件很多:1.菌体的生长环境,PH,温度,酸碱,如果在发酵罐上还要考虑罐压,搅拌和通气等一系列影响溶氧的条件;
                           2.从培养基的角度优化,需要考虑碳源和氮源的比例,氮源的单一性和复合性影响,无机盐离子的影响,以及一些微量元素的影响;
                           3.如果诱导产酶,需要考虑最佳诱导的时间点,最佳产酶的PH,温度,诱导剂浓度等。
工作量还是不小的
14楼2016-05-04 09:34:37
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zywys2009

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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bxzc12345: 金币+17 2016-05-06 15:49:52
优化是一个系统的过程,对设备要求也很高。我简单谈一下个人体会。
摇瓶水平就不多说了,主要是限制性因素太多,在某些条件下,很可能得出相反的结论。
发酵罐水平的优化,首先你至少得有一套3连罐或同型号的3个罐(不同厂家的罐在设计时,动力学模型不完全相同,通常会产生一定差异,我们之前使用比欧的罐和国强的罐,差别比较明显),其次得有一套可靠的分析设备(尾气分析,液相,个别培养基会用到气相,小设备就不提了),最后你得有帮手,一个人干太累了。
优化前先找一下文献,虽然数据未必都是真实的,但能确定个大体范围,如果没有文献就比较辛苦了,通常从培养基组成开始优化(优化没有最好,所以什么响应面、PB神马的其实意义不大),其次是控制工艺。真正重要的是选定哪些参数作为判断标准以及选哪些实验点,这个需要根据产物的性质(初级还是次级,蛋白质还是多糖或者其它)以及发酵方式(是否需要诱导,是否好氧)来判断,这些工作做精了其中一个就足以发表一篇文章。
有些书虽然很老了,但思路很好,应用也很广,值得一读,比如《多尺度微生物过程优化》,《代谢工程》等
15楼2016-05-06 11:43:23
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xmc苦行者

木虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by LV疯子LV at 2016-04-29 13:32:03
我觉得,做任何优化前,确认了这个菌的生长特性是关键。
可以先优化下培养条件,比如,温度,发酵液ph,培养周期等

如何确认这个菌的生长特性呢
16楼2016-05-21 19:10:53
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jackie在努力

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by bxzc12345 at 2016-04-30 08:26:43
请问诱导剂是什么?
...

不好意思现在才看到,诱导剂一般的话我们用的都是IPTG,乳糖和阿拉伯糖也有,pET系统的话主要就是IPTG,看你的启动子了
17楼2016-09-11 00:21:57
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