应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 使用CTAB提取植物总DNA的问题（求助结束）
101/1返回列表
查看: 1466  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 iamrohy 的 2 个金币

iamrohy

银虫 (初入文坛)

[交流] 使用CTAB提取植物总DNA的问题（求助结束）

使用CTAB法提水稻和大豆的DNA
过程大致：（以大豆为例）
1、约1g叶片进行研磨
2、加入3ml 的1×CTAB & 100ul 的 β-巯基乙醇后，65℃水浴40min，平均10min混匀一次
3、之后，再加入等体积的氯仿异戊醇（24：1）混匀，在室温下，12000rpm离心10min，取上清液。
4、再加入等体积氯仿异戊醇溶液10000rpm离心10min，取上清液。
5、加入两倍体积的无水乙醇，置于4℃冰箱静置。

问题：在第5步中加入无水乙醇之后发现，溶液中存在大量的乳白色的杂质沉淀，这是什么原因？如何解决？

谢谢！～

非常感谢大家，问题已经解决了，发现是CTAB有问题，重新配过之后就好了
[search]dna提取  大量沉淀[/search]

[ Last edited by iamrohy on 2008-10-30 at 21:06 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
多俗呀，不写了
1楼 2008-10-27 13:41:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaotian2005

木虫 (职业作家)
★
iamrohy(金币+1,VIP+0):谢谢，问题解决了，原来是CTAB的问题
正常，无水乙醇就是用来沉淀DNA的！
赞一下(3人) 回复此楼
心态决定一切
2楼2008-10-27 15:03:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

iamrohy

银虫 (初入文坛)
关键是加入无水乙醇后还没有放入4度冰箱静置，在光底下就发现悬浮的乳白色的杂质沉淀
赞一下 回复此楼
多俗呀，不写了
3楼2008-10-27 15:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mofashishe

铜虫 (小有名气)
★
iamrohy(金币+1,VIP+0):谢谢，问题解决了，原来是CTAB的问题
好正常的，有时直接在第5部把DNA挑出来再用酒精洗的。。。。。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2008-10-27 16:17:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天涯海角

木虫 (著名写手)

害群之牛
★
iamrohy(金币+1,VIP+0):谢谢，问题解决了，原来是CTAB的问题
很正常，没必要往四度冰箱放置，白色絮状的东东，就是dna，用75%的酒精洗两次，再用ddh20溶解了就可以用了！
赞一下(3人) 回复此楼
井底之蛙也可笑看天下
5楼2008-10-27 17:45:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

游侠892

铁杆木虫 (著名写手)
★
iamrohy(金币+1,VIP+0):谢谢，问题解决了，原来是CTAB的问题
乳白色的杂质沉淀，就是DNA，但有可能是DNA被打断了，片段比较小。
赞一下(1人) 回复此楼
路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
6楼2008-10-27 18:37:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欣晴5832

金虫 (小有名气)
★
iamrohy(金币+1,VIP+0):谢谢，问题解决了，原来是CTAB的问题
这很正常，沉淀DNA之后也可以离心一下，然后再用75%乙醇洗两次就可以了。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2008-10-27 23:27:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

十比

木虫 (著名写手)
再正常不过了.
回复此楼
8楼2008-10-27 23:34:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mever

木虫 (正式写手)
★ ★
iamrohy(金币+2,VIP+0):谢谢，问题解决了，原来是CTAB的问题
应该有两种可能：
1 蛋白质没有除净，建议使用酚氯仿异戊醇25：24：1抽提一到两次，再用氯仿异戊醇抽提一次。鉴别标准是抽提的液相界面清亮无白色物质
2.你的CTAB提取液中盐离子成分过高，在加入乙醇后很容易析出，掺杂在DNA中，解决办法是离心沉淀后再用70%乙醇洗涤白色的DNA沉淀，多洗几次将盐离子洗涤出来。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2008-10-28 08:33:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jbhu220

铁杆木虫 (职业作家)
★
iamrohy(金币+1,VIP+0):谢谢，问题解决了，原来是CTAB的问题
DNA是棉絮状的，没有颜色的。沉淀的很可能是蛋白质，说明你纯化有问题，可加25：234：1先抽提一次，再用24：1抽提一次，注意不要吸取离心沉淀的蛋白质
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2008-10-28 09:39:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 iamrohy 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 11:25 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 09:35 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 09:13 by xSrQNSSjcgoX
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 08:40 by xSrQNSSjcgoX
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 08:07 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 4/200 2026-11-15 06:50 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-15 00:27 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 7/350 2026-11-14 22:44 by Equinoxhua
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-14 20:11 by KXypaGgBBlw7
[考博] 考博求助 10+3 社会实践对别 2026-11-08 3/150 2026-11-13 14:04 by 沐小虫252
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-13 11:37 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-13 11:13 by Equinoxhua
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 16:55 by zzy933268
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:36 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 10:03 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:00 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭