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xmc101572

新虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
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帖子: 530
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注册: 2014-03-24
专业: 细胞信号转导

[求助] 酶切已有1人参与

质粒，两个酶切位点相差30bp为何切不开啊！请各位虫友知道啊！已经切了一个星期了

发自小木虫Android客户端

» 猜你喜欢

1楼 2016-04-24 21:59:34

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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

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应助: 682 (博士)
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专业: 植物生理与生化

怎么判断的切不开？

2楼2016-04-25 12:44:14

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荷岚102

新虫 (初入文坛)

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虫号: 4585974
注册: 2016-04-13
专业: 植物生理与生化

引用回帖:

2楼: Originally posted by stone2239 at 2016-04-25 12:44:14
怎么判断的切不开？

酶切后连接600bp的片段，转化，然而菌液PCR所克隆的片段大小一直为没有酶切过的片段长度

发自小木虫Android客户端

3楼2016-04-25 20:11:25

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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

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专业: 植物生理与生化

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

确定酶没有失活吗？用的哪个公司的酶？buffer用对了吗？一般情况下，相隔30bp是可以用双酶切切开的。

4楼2016-04-26 00:56:06

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