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zhongliruoqi新虫 (小有名气)
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请教小鼠脑片的冰冻切片的相关问题 已有1人参与
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大家好，请问有没有大侠做过脑片的冰冻切片的？最近需要做相关的免疫实验，脑片380um，纯纯的新手。。。而且实验室没有做相关实验的。。各种查阅资料经验以及请教其他实验室做过组织冰冻切片的同学后，自己在尝试4%多聚甲醛固定过24h、4h的脑片在OCT包埋（剪去尖部的1.5mL EP管作为容器）和液氮速冻时还是感觉问题重重，主要有以下几点，希望可以与各位有相关经验的同志们交流学习，谢谢大家！ 1.如果后续做免疫荧光的话，脑片切多少um效果更好？8um可以吗？ 2.OCT包埋时，脑片距离包埋完毕时的OCT表面多少距离比较好（因为涉及到冰冻切片时的修块问题） 3.脑片在OCT中很难保持水平，总会出现倾斜，如何解决呢？ 4.OCT包埋时总会有些大小不等的气泡，会影响之后的液氮速冻吗？因为发现液氮速冻后，包埋剂的表面不平整，总有些突起状 5.如果在液氮速冻时，钓入液氮罐的放有包埋好的样品的EP管接触到了漏入自制小盒的液氮液体，出现“沸腾状”，会对包埋的样品有影响吗？ 希望路过的朋友们可以给出一些意见或建议，交流学习，谢谢大家！ |
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