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glsjhxc

铁虫 (初入文坛)

[交流] 色谱柱的保养

请问液相色谱柱用水以0.5ml/min冲洗,是不是对柱子的伤害很大呢
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kkbyb

木虫 (著名写手)

那要看你冲多长时间,事情本来就是没有绝对的。要是AQ的柱子还可以用纯水做流动相呢,你说呢?当然氨基柱的水分比例是不能超过30%的,一般因为正相柱的技术原因还不支持大比例的水做流动相
2楼2008-10-26 22:55:18
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fayzz1129

银虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教!
反相柱最好不要用纯水冲太长时间,如果是流动相就没办法(如利巴韦林)
如果流动相中有盐,在做完实验冲柱子时先用5%或10%的甲醇先冲30min,再换纯有机相。
3楼2008-10-27 09:39:45
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glsjhxc

铁虫 (初入文坛)

谢谢两位的指点!
4楼2008-10-27 22:39:44
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lxbnnn

银虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供!
我经常用纯水冲洗,一般不超过1小时,特殊情况下也有冲洗2~3小时的情况,至少没有发现柱效有明显的降低,寿命就不好说了,不过至少没有异常的寿命缩短。
据我所知的一些情况如下:

1.是否耐纯水和硅胶基质的外形、大小、粒径无关,我本人用的色谱柱中没发生用纯水冲坏的(不过很少用“纯国产”的色谱柱)。
2.即使是进口填料,国内填充的色谱柱我也没遇到这种情况。
3.已经证实纯水对色谱柱最大的影响是长期(具体多长不祥,不过很多广告声称其耐纯水的色谱柱可以连续使用1000小时以上)用纯水冲洗,某些色谱柱键合的碳链会收缩,造成对流动相和溶质的不浸润,不保留。
4.一旦发生上述的不浸润,一般都可以用异丙醇再生色谱柱
5楼2008-10-29 17:49:53
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dqmcq

金虫 (正式写手)

小木虫区长总管


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢!
可以用纯水冲洗。如果的流动相是缓冲液,必须用水冲洗后再换成甲醇等流动相。水冲洗的作用是将管道和柱内的缓冲液冲洗,以防甲醇等溶剂直接冲洗造成沉淀。所以水冲洗时的体积不用太大,一般冲洗10min就足够了。
09了,又老了一岁!
6楼2008-10-29 22:22:40
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panda7228

0.5ml/min 10f分钟够吗
7楼2008-11-03 19:52:49
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dingjiangang

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by glsjhxc at 2008-10-26 22:34:
请问液相色谱柱用水以0.5ml/min冲洗,是不是对柱子的伤害很大呢

不错。得看柱子的种类和冲柱子的时间。不过我觉得还是别用纯水安全一点。我大部分使用的是反相柱,曾经使用美国luna柱,它说明上可以耐长时间的纯水冲洗,但用了不到2个月,还不到1千个样品,柱效就降低很多。
  使用缓冲盐时,用水冲洗时,可以5%的甲醇水在半个小时内变到50%,使用梯度洗脱就可以达到很好的效果。对了,泵头也应该用水清洗。还有定量环。
8楼2008-11-03 21:48:56
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