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glsjhxc

铁虫 (初入文坛)

[交流] 色谱柱的保养

请问液相色谱柱用水以0.5ml/min冲洗,是不是对柱子的伤害很大呢
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1楼 2008-10-26 22:34:21
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kkbyb

木虫 (著名写手)
那要看你冲多长时间，事情本来就是没有绝对的。要是AQ的柱子还可以用纯水做流动相呢，你说呢？当然氨基柱的水分比例是不能超过30%的，一般因为正相柱的技术原因还不支持大比例的水做流动相
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2楼2008-10-26 22:55:18
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fayzz1129

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！
反相柱最好不要用纯水冲太长时间，如果是流动相就没办法（如利巴韦林）
如果流动相中有盐，在做完实验冲柱子时先用5%或10%的甲醇先冲30min，再换纯有机相。
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3楼2008-10-27 09:39:45
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glsjhxc

铁虫 (初入文坛)
谢谢两位的指点！
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4楼2008-10-27 22:39:44
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lxbnnn

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！
我经常用纯水冲洗，一般不超过1小时，特殊情况下也有冲洗2～3小时的情况，至少没有发现柱效有明显的降低，寿命就不好说了，不过至少没有异常的寿命缩短。
据我所知的一些情况如下：

1.是否耐纯水和硅胶基质的外形、大小、粒径无关，我本人用的色谱柱中没发生用纯水冲坏的（不过很少用“纯国产”的色谱柱）。
2.即使是进口填料，国内填充的色谱柱我也没遇到这种情况。
3.已经证实纯水对色谱柱最大的影响是长期（具体多长不祥，不过很多广告声称其耐纯水的色谱柱可以连续使用1000小时以上）用纯水冲洗，某些色谱柱键合的碳链会收缩，造成对流动相和溶质的不浸润，不保留。
4.一旦发生上述的不浸润，一般都可以用异丙醇再生色谱柱
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5楼2008-10-29 17:49:53
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dqmcq

金虫 (正式写手)

小木虫区长总管
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢！
可以用纯水冲洗。如果的流动相是缓冲液，必须用水冲洗后再换成甲醇等流动相。水冲洗的作用是将管道和柱内的缓冲液冲洗，以防甲醇等溶剂直接冲洗造成沉淀。所以水冲洗时的体积不用太大，一般冲洗10min就足够了。
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09了，又老了一岁！
6楼2008-10-29 22:22:40
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panda7228

0.5ml/min 10f分钟够吗
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7楼2008-11-03 19:52:49
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dingjiangang

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by glsjhxc at 2008-10-26 22:34:
请问液相色谱柱用水以0.5ml/min冲洗,是不是对柱子的伤害很大呢

不错。得看柱子的种类和冲柱子的时间。不过我觉得还是别用纯水安全一点。我大部分使用的是反相柱，曾经使用美国luna柱，它说明上可以耐长时间的纯水冲洗，但用了不到2个月，还不到1千个样品，柱效就降低很多。
  使用缓冲盐时，用水冲洗时，可以5%的甲醇水在半个小时内变到50%，使用梯度洗脱就可以达到很好的效果。对了，泵头也应该用水清洗。还有定量环。
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8楼2008-11-03 21:48:56
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