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容和buyer

新虫 (小有名气)

[求助] 师姐筛选的野生菌株,活性没了,不知道是什么原因,希望大家能够帮忙想想办法 已有3人参与

师姐从土壤中筛选出的野生菌株有产酶功能,本来我的任务是提高产酶效果,但是苦于她给我的时候的斜面全部都不是一个属的,也就是被污染了,最后还是在-80°C中的冻存管里找到这个属的,找到后尝试了好多种方法,用原先它培养的最佳条件活化传代,但是酶活基本为0,实验没有任何进展。
想问一下,野生菌株会在保存中丢失他的性能么,保存了2年左右。老师一直让做这个,我感觉会被这个拖累死。该怎么办?
我大致上用了,取冻存管里的冰渣,放入LB培养基然后再转入产酶培养基,不停的转接;
也用过直接取冻存管里的冰渣,放入产酶培养基,不停的转接;
也试过,先从-80°C拿出来,然后放入-20°C,再放入4°C,再重复前面两步;但是都没有效果,怎么办。
万分感谢有人能够解答疑惑,不胜感激
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容和buyer

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by awaken2013 at 2016-04-24 21:12:22
1 你师姐筛选出来个菌株产的酶有没有被报道过?如果有 请查基因序列直接合成

这个酶很多人做,是甘露聚糖酶,真的可以直接基因序列合成么,那大家还这么热的做他干啥
12楼2016-04-25 08:18:37
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小贤2014

新虫 (小有名气)

2楼2016-04-21 15:47:33
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sunny_阳

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
容和buyer: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-04-22 09:27:22
活化不出来  就没必要做了
活化出来  没有酶活性  也就没必要在酶活上研究  可以换个研究方向
如果觉得研究方向很有价值  重复你师姐的试验  重新筛菌
保存过程中菌的性能是会改变的  不稀奇
无怒放,不青春
3楼2016-04-21 17:35:55
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wubingqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
容和buyer: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-04-22 09:27:36
-80保存就了性能会改变,也许某些关键的质粒丢失都是有可能的,建议不断驯化培养,如果实在没有活性了,也没真的没办法了。
4楼2016-04-22 09:03:10
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