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容和buyer

新虫 (小有名气)

[求助] 师姐筛选的野生菌株,活性没了,不知道是什么原因,希望大家能够帮忙想想办法 已有3人参与

师姐从土壤中筛选出的野生菌株有产酶功能,本来我的任务是提高产酶效果,但是苦于她给我的时候的斜面全部都不是一个属的,也就是被污染了,最后还是在-80°C中的冻存管里找到这个属的,找到后尝试了好多种方法,用原先它培养的最佳条件活化传代,但是酶活基本为0,实验没有任何进展。
想问一下,野生菌株会在保存中丢失他的性能么,保存了2年左右。老师一直让做这个,我感觉会被这个拖累死。该怎么办?
我大致上用了,取冻存管里的冰渣,放入LB培养基然后再转入产酶培养基,不停的转接;
也用过直接取冻存管里的冰渣,放入产酶培养基,不停的转接;
也试过,先从-80°C拿出来,然后放入-20°C,再放入4°C,再重复前面两步;但是都没有效果,怎么办。
万分感谢有人能够解答疑惑,不胜感激
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awaken2013

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 容和buyer at 2016-04-25 08:18:37
这个酶很多人做,是甘露聚糖酶,真的可以直接基因序列合成么,那大家还这么热的做他干啥...

甘露聚糖酶都做烂了的酶种,你老板还让提高产量…除非你师姐的酶有什么特别之处。基因合成是快速获取目的基因的方法而已 没什么不可取的 至于研究的意义 那就是你要思考的问题而不是我。

发自小木虫IOS客户端
16楼2016-04-25 13:57:16
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普通回帖

小贤2014

新虫 (小有名气)

2楼2016-04-21 15:47:33
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sunny_阳

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
容和buyer: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-04-22 09:27:22
活化不出来  就没必要做了
活化出来  没有酶活性  也就没必要在酶活上研究  可以换个研究方向
如果觉得研究方向很有价值  重复你师姐的试验  重新筛菌
保存过程中菌的性能是会改变的  不稀奇
无怒放,不青春
3楼2016-04-21 17:35:55
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wubingqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
容和buyer: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-04-22 09:27:36
-80保存就了性能会改变,也许某些关键的质粒丢失都是有可能的,建议不断驯化培养,如果实在没有活性了,也没真的没办法了。
4楼2016-04-22 09:03:10
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容和buyer

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小贤2014 at 2016-04-21 15:47:33
没做过!

一个人瞎摸索,真是累
5楼2016-04-22 09:21:39
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容和buyer

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sunny_阳 at 2016-04-21 17:35:55
活化不出来  就没必要做了
活化出来  没有酶活性  也就没必要在酶活上研究  可以换个研究方向
如果觉得研究方向很有价值  重复你师姐的试验  重新筛菌
保存过程中菌的性能是会改变的  不稀奇

当老师对他这个菌株抱有很大的希望,这菌株酶活上研究才有意义。原来保存过程中菌的性能会改变。谢谢啦。
6楼2016-04-22 09:23:28
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容和buyer

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wubingqi at 2016-04-22 09:03:10
-80保存就了性能会改变,也许某些关键的质粒丢失都是有可能的,建议不断驯化培养,如果实在没有活性了,也没真的没办法了。

野生菌也会丢失吗?我只听同学说工程菌容易不稳定啥的。哎,自求多福了
7楼2016-04-22 09:26:48
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矜天

木虫 (正式写手)

有可能你被你师姐坑了
8楼2016-04-23 17:45:05
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awaken2013

铜虫 (小有名气)

1 你师姐筛选出来个菌株产的酶有没有被报道过?如果有 请查基因序列直接合成

发自小木虫IOS客户端
9楼2016-04-24 21:12:22
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MY小蟲

银虫 (小有名气)

没有活性就没必要做了,要是很有意义再从土壤中分离菌种,只是过程比较漫长。

发自小木虫Android客户端
工科男 实验狗
10楼2016-04-24 21:17:55
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