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sangnana

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因克隆 已有1人参与

在ncbi上找目的基因只找到了相关的mRNA,这些序列都是直接输进去的,没有相关的文献,想问下,可不可以利用输入的mRNA序列设计特异性引物,然后以转录生成的cDNA为模板进行pcr扩增来得到目的基因片段。请各位大神帮忙解答一下,谢谢!

@biostar2009 @飞约疯人院 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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sangnana

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-19 20:43:36
我现在就是做类似的实验,第一次设计了引物,没扩出来,后来又思考,查文献,设计了第二批引物,还没跑胶,应该是不好扩的。

我想根据图中的保守区设计上下游引物,怎么设计呢,求详细指导一下,谢谢谢谢!
基因克隆



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4楼2016-04-20 09:46:39
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sandycool

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我现在就是做类似的实验,第一次设计了引物,没扩出来,后来又思考,查文献,设计了第二批引物,还没跑胶,应该是不好扩的。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2016-04-19 20:43:36
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sangnana

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-19 20:43:36
我现在就是做类似的实验,第一次设计了引物,没扩出来,后来又思考,查文献,设计了第二批引物,还没跑胶,应该是不好扩的。

那你知道怎么设计引物嘛?可否给我详细说一下哇?万分感谢,因为我们实验室都没有人做这一块,所以你有时间的话,可不可以指导一下,真的特别感谢!

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3楼2016-04-20 09:28:20
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