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sangnana

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因克隆 已有1人参与

在ncbi上找目的基因只找到了相关的mRNA，这些序列都是直接输进去的，没有相关的文献，想问下，可不可以利用输入的mRNA序列设计特异性引物，然后以转录生成的cDNA为模板进行pcr扩增来得到目的基因片段。请各位大神帮忙解答一下，谢谢！

@biostar2009 @飞约疯人院 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-04-19 15:19:37
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sangnana

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-19 20:43:36
我现在就是做类似的实验，第一次设计了引物，没扩出来，后来又思考，查文献，设计了第二批引物，还没跑胶，应该是不好扩的。

那你知道怎么设计引物嘛？可否给我详细说一下哇？万分感谢，因为我们实验室都没有人做这一块，所以你有时间的话，可不可以指导一下，真的特别感谢！

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3楼2016-04-20 09:28:20
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sandycool

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我现在就是做类似的实验，第一次设计了引物，没扩出来，后来又思考，查文献，设计了第二批引物，还没跑胶，应该是不好扩的。

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sangnana sangnana
2楼2016-04-19 20:43:36
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sangnana

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-19 20:43:36
我现在就是做类似的实验，第一次设计了引物，没扩出来，后来又思考，查文献，设计了第二批引物，还没跑胶，应该是不好扩的。

我想根据图中的保守区设计上下游引物，怎么设计呢，求详细指导一下，谢谢谢谢！
基因克隆



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4楼2016-04-20 09:46:39
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