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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » DNA 形成G-四连体
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甲基

铜虫 (小有名气)

[求助] DNA 形成G-四连体 已有1人参与

买了一段DNA链，文献上说80度10min,然后缓慢冷却至室温，形成G-四连体请问这个80度是用什么加热的，买来的DNA是直接放在离心管里面的，先用缓冲溶解，直接用离心管加热么，离心管会不会变形？请各路大神帮帮忙@biostar2009
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1楼 2016-04-18 16:27:08
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
甲基: 金币+10 2016-04-20 19:05:57
80℃加热用热水即可。实际上这个温度也不需要非常精确，就是加热破坏DNA链原有的不太稳定的二级结构而已。

担心不耐高温的话去找 PCR专用EP管即可，因为 PCR 需要经历 75~90 ℃ 的高温。
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2楼2016-04-20 15:17:58
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

另外，你好像想问能不能用买来DNA时包装的离心管加热。看来你好像有点缺乏生物化学实验的常识。哪有把所有买来的试剂一下子全拿去处理的道理，买来DNA后一般的操作原则都是在原包装离心管里配制成10^-6 ~ 10^-4 M的储备溶液，冷藏，需要的时候计算好量，从储备液里移取一部分到其他的EP管里进行操作处理。

建议你多向熟悉生物化学实验的人了解一些实验常识，感觉你这样开展实验会犯很多低级错误。
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3楼2016-04-20 15:22:09
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甲基

铜虫 (小有名气)
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4楼2016-04-20 16:58:45
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甲基

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by greeneese at 2016-04-20 15:22:09
另外，你好像想问能不能用买来DNA时包装的离心管加热。看来你好像有点缺乏生物化学实验的常识。哪有把所有买来的试剂一下子全拿去处理的道理，买来DNA后一般的操作原则都是在原包装离心管里配制成10^-6 ~ 10^-4 M的 ...

您好！请问我是把买来的DNA先分装，用的时候取一管加热变成四连体，还是先把多量的DNA变成四连体再分装？请问四连体也是冷冻保存么，不太懂，麻烦帮帮忙
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成功与失败都是人生的一种经历，淡然待之就好
5楼2016-04-20 19:10:24
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 甲基 at 2016-04-20 19:10:24
您好！请问我是把买来的DNA先分装，用的时候取一管加热变成四连体，还是先把多量的DNA变成四连体再分装？请问四连体也是冷冻保存么，不太懂，麻烦帮帮忙...

原料分装都是在进行任何实际实验之前进行的啊。先把原料DNA制成储备溶液冷藏，使用的时候取一部分转化成四连体。

初期实验里，对储备液一般都是用多少取多少，用储备液制备的四连体一般在当次实验用完；等熟练有把握之后才大量的制备四连体，多余的四连体冷藏。
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6楼2016-04-21 08:41:08
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甲基

铜虫 (小有名气)
非常感谢您！

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7楼2016-04-21 10:20:55
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