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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 电泳严重拖尾
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327351493

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 电泳严重拖尾 已有3人参与

求助！有人知道这个拖尾是什么原因产生的吗？怎样改变这种状况？

电泳严重拖尾


@biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-04-18 14:37:23
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Ivy尘

新虫 (正式写手)
Marker条带清晰，说明胶和电泳条件没问题，所以问题可能是：
1.PCR非特异性扩增
2.样品可能混入了杂质
3.点样孔有残留，说明可能有蛋白质，
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327351493
2楼2016-04-18 14:45:17
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骡神赛亚人

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 327351493 at 2016-04-18 14:37:23
求助！有人知道这个拖尾是什么原因产生的吗？怎样改变这种状况？

biostar2009 youlinglyw ...

蛋白没有除干净，也可能是DNA比较脆弱前期处理过程中剧烈震荡使得DNA断裂成小片段，没有灯泡状明亮圆圈说明RNA清楚的较好

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3楼2016-04-18 15:13:36
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骡神赛亚人

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
1楼: Originally posted by 327351493 at 2016-04-18 14:37:23
求助！有人知道这个拖尾是什么原因产生的吗？怎样改变这种状况？

biostar2009 youlinglyw ...

继续脱蛋白，处理过程中不要剧烈震荡以防DNA片段破碎

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327351493
4楼2016-04-18 15:15:53
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
M完好，胶没问题。弥散“大瀑布”，说明模板/基因组降解，对你的基因组/模板取2ul跑电泳，看完整性。
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327351493
5楼2016-04-18 15:18:51
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327351493

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Ivy尘 at 2016-04-18 14:45:17
Marker条带清晰，说明胶和电泳条件没问题，所以问题可能是：
1.PCR非特异性扩增
2.样品可能混入了杂质
3.点样孔有残留，说明可能有蛋白质，

谢谢！

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6楼2016-04-19 07:13:36
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327351493

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 骡神赛亚人 at 2016-04-18 15:13:36
蛋白没有除干净，也可能是DNA比较脆弱前期处理过程中剧烈震荡使得DNA断裂成小片段，没有灯泡状明亮圆圈说明RNA清楚的较好
...

谢谢！

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7楼2016-04-19 07:14:08
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327351493

铁杆木虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 骡神赛亚人 at 2016-04-18 15:15:53
继续脱蛋白，处理过程中不要剧烈震荡以防DNA片段破碎
...

谢谢！

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8楼2016-04-19 07:14:35
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327351493

铁杆木虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-18 15:18:51
M完好，胶没问题。弥散“大瀑布”，说明模板/基因组降解，对你的基因组/模板取2ul跑电泳，看完整性。

谢谢

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9楼2016-04-19 07:14:50
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327351493

铁杆木虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Ivy尘 at 2016-04-18 14:45:17
Marker条带清晰，说明胶和电泳条件没问题，所以问题可能是：
1.PCR非特异性扩增
2.样品可能混入了杂质
3.点样孔有残留，说明可能有蛋白质，

谢谢

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10楼2016-04-19 07:15:48
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