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skysimon

新虫 (初入文坛)

[求助] 救命啊,色谱柱快废了,峰型好差。 已有3人参与

实验室去年底买了两根色谱柱,我一直在用苯基柱,另外一根是通用C18。年前用还是好的,年后回来用同样的跑同样的样品,峰型就变得好差。刚刚开始以为是流动相的问题。这一周重复配了6个流动相,发现还是不行。今天换C18跑,发现能跑出来。小弟把图贴上,请教各位前辈,苯基柱出了什么问题以及怎么解决?

仪器:waters超高效液相
流动相:50-95梯度甲醇:缓冲盐(磷酸/磷酸二氢钾) ph---2.6
样品:浸膏 (主要为酚酸类)
图1---- 早期的苯基柱跑
图2----最近用的苯基柱跑
图3-----今天用C18通用柱跑

救命啊,色谱柱快废了,峰型好差。
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救命啊,色谱柱快废了,峰型好差。-1
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救命啊,色谱柱快废了,峰型好差。-2
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
苯基柱似乎老了,也许平时样品比较杂,只能多洗,再者,进样量减少点。
4楼2016-04-18 18:45:02
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psd0714

木虫 (著名写手)

磷酸盐缓冲液作为流动相很容易堵塞仪器的,每次用完要多冲,否则下次重现性容易做不好

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6楼2016-04-18 21:42:40
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shi102241218

木虫 (著名写手)

换个预柱芯试试,可能是预柱芯坏了!
3楼2016-04-18 12:23:29
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Mr.咸鱼

木虫 (小有名气)

缓冲盐对所有的柱子都会有损伤,只是时间长短的问题,前面有人提到了筛板,如果是筛板堵了什么的,一般压力会很好的。你这种情况,基线没什么问题,图2和图1对比,出峰位置没变,只是分离性能下降很多,应该是缓冲盐破坏了苯基柱的固定相。不用想着怎么去冲洗或者活化,十有八九柱子已经废了

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想来生活无非是痛苦和美丽
13楼2016-04-19 14:06:39
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

你或其他用户有没有出现过接头没弄好,跑了一半跳开了的情况?如果发生过柱子基本上就毁了。没有的话试试把柱子反接。

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15楼2016-04-19 14:28:53
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普通回帖

上海波粒

铜虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
洗柱子吧,多洗洗,洗干净就好了
2楼2016-04-18 11:34:07
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

用甲醇活化下柱子 再测下柱效看看是不是柱子的问题 不行就换筛板 你们的配件里面肯定有的
5楼2016-04-18 20:01:20
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chunchun2013

铜虫 (正式写手)

买根色谱柱就三千块,柱子用久了柱效下降很正常

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7楼2016-04-18 22:11:08
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哼哼_哈哈

新虫 (小有名气)

先把进样管路清洗一下,过滤或者保护柱芯换了,用比平时三倍的流动相低速冲洗柱子几个小时试试!

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8楼2016-04-18 22:51:21
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skysimon

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shi102241218 at 2016-04-18 12:23:29
换个预柱芯试试,可能是预柱芯坏了!

换预柱芯恐怕没这个条件。请问,柱芯对分离有什么影响吗?后来跑的C18也是用原来的预柱芯,也能跑出来。
9楼2016-04-18 23:47:53
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skysimon

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lifucheng at 2016-04-18 20:01:20
用甲醇活化下柱子 再测下柱效看看是不是柱子的问题 不行就换筛板 你们的配件里面肯定有的

如果现在是缓冲盐析出了那么用纯甲醇活化的话,析出岂不是更严重?
10楼2016-04-18 23:49:20
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