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XMU_WXW

金虫 (正式写手)

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[求助] HPLC-MS/MS求助已有2人参与

用Agilent1290串联Agilent 6490做油脂成分分析。油脂样品在进行ESI-MS分析前先经HPLC分离。当采用ESI-MS正极分析时，
样品首先经过ZOBAX SBC18柱(1.8μm,2.1mm×150mm,Agilent)分离，柱温
40℃。流动相分为A相(甲醇:乙腈:水=19:19:2,V/V/V)和B相(异丙醇)，两相均含
10mM醋酸铵和0.1%(W/V)甲酸。这边我们用的是 ZORBAX SBC18柱(1.8μm,2.1mm×150mm,Agilent)，首先请问这两者有什么区别！接下来就是跑样的问题，我们的油脂样品是用氯仿甲醇1比1溶的，我们用新柱子的时候跑出来的样品都没问题，但是第二次用的时候就感觉出峰时间往后推了好多，好多样按正常步骤都跑不出来，而且正常平衡的时候柱压比第一次跑的时候高了40，从140bar变成了180bar。安捷伦的工程师说是流动相有水的成分在的时候不能用氯仿去溶解，这样会产生混浊，容易堵。但是好多文献都是用的氯仿甲醇溶的油脂样品，希望有经验的指教一下！万分感谢了！！

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1楼2016-04-13 18:17:30

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引用回帖:

2楼: Originally posted by zinfly at 2016-04-13 21:09:41
你第一个问题：这两个有什么区别，请问你，要问什么的区别？流动相么
可以用异丙醇溶解吧，或者先用正己烷溶-异丙醇溶解成高浓度，再用异丙醇稀释。我们用超临界合相色谱分的别好，时间也比较短。
另外给你推荐个 ...

谢谢你的回答。那两个柱子，我们买的中间多了一个R！如果用异丙醇溶解，会不会影响保存，一般油脂提取之后-20或者-80可以在异丙醇存多久？

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