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Zhanjiang001

新虫 (初入文坛)

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改成分步酶切试试，每次切完后都纯化一次，我就有过这样的经历

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21楼2016-04-17 10:21:18

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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

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专业: 生物物理、生物化学与分子

50ul体系切1ugDNA，用酶各1ul,电泳时大片段只切亮带的前80%，可以减少假阳性

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22楼2016-04-17 11:00:58

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娟恋幸福

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请问一下你切开后构建的质粒阳性多吗

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23楼2016-04-17 11:29:16

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kingjazz23

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【答案】应助回帖

引用回帖:

7楼: Originally posted by yangdl1023 at 2016-04-13 16:25:29
具体的量我们都没测，这么跟你讲吧，一般质粒扩增完，用miniplasmid kit提完，每个柱子用50ul H2O elution. 如果你是做vector的话，应在20 ul,就够了（一般我们用12，你多一步回收，会有损失可以多用点），如果你是 ...

你好，我想问问你一般用miniplasmid kit提取质粒的话，得率是多少啊？因为我最近也在弄酶切，回收后再跑电泳，发现浓度好低，不知道究竟哪步出现问题了，我刚开始以为是我加P2后，没有静置一会，使菌没有充分裂解，而且我发现我加完P2后，也没有变澄清，想请教一下你是什么问题

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24楼2016-04-28 14:14:49

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