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Zhanjiang001

新虫 (初入文坛)

改成分步酶切试试,每次切完后都纯化一次,我就有过这样的经历

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21楼2016-04-17 10:21:18
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

50ul体系切1ugDNA,用酶各1ul,电泳时大片段只切亮带的前80%,可以减少假阳性

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22楼2016-04-17 11:00:58
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娟恋幸福

新虫 (小有名气)

请问一下你切开后构建的质粒阳性多吗

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23楼2016-04-17 11:29:16
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kingjazz23

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by yangdl1023 at 2016-04-13 16:25:29
具体的量我们都没测,这么跟你讲吧,一般质粒扩增完,用miniplasmid kit提完,每个柱子用50ul H2O elution. 如果你是做vector的话,应在20 ul,就够了(一般我们用12,你多一步回收,会有损失可以多用点),如果你是 ...

你好,我想问问你一般用miniplasmid kit提取质粒的话,得率是多少啊?因为我最近也在弄酶切,回收后再跑电泳,发现浓度好低,不知道究竟哪步出现问题了,我刚开始以为是我加P2后,没有静置一会,使菌没有充分裂解,而且我发现我加完P2后,也没有变澄清,想请教一下你是什么问题
24楼2016-04-28 14:14:49
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