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锋子文

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 吾药丁香 at 2016-04-15 09:53:55
是不是长期用缓冲盐,柱子坏了,换一根试试

有一根是新柱子
21楼2016-04-18 10:29:20
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锋子文

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by xjhww淘 at 2016-04-16 11:27:05
有可能是六通阀堵了,如果是进样后压力增大,有可能是进样底座堵了,柱子前堵,柱子堵,柱子后段堵,反过来接,多冲一会,不要接到检测池,否则会污染检测池

走样过程柱压往上生。现在的解决方法是用0.1%磷酸冲柱子或者低流速IPA反向冲柱子把压力降下然后继续使用。但柱压还是很快变高。
22楼2016-04-18 10:30:29
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锋子文

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by xjhww淘 at 2016-04-16 11:28:32
要关注一下,色谱柱类型,有的色谱柱不能倒用,建议用低流速高比例水相进样冲洗

这个我晓得,已经这样用了很久了。最近才出现的问题
23楼2016-04-18 10:31:21
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

反冲一下针座看看
铁甲依然在
24楼2016-04-18 10:31:44
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Van_zhu

新虫 (小有名气)

反冲柱子是没有用的,有些柱子可能会冲塌。买根预柱或者改缓冲溶液吧!重新换柱子成本很高!

发自小木虫Android客户端
碎碎念念的砖家
25楼2016-04-18 11:05:55
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optimas91

金虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by 锋子文 at 2016-04-18 10:28:55
缓冲盐10mM,不算高。样品缓冲盐都是过滤过的,样品澄清。不加柱子用水-乙腈或者乙腈-缓冲盐柱压都没有变化的,现在的解决方法是用0.1%磷酸冲柱子或者低流速IPA反向冲柱子把压力降下然后继续使用。但柱压还是很快变 ...

柱子保存最好用100%乙腈吧,你用0.1%磷酸缓冲溶液保存柱子了么?用缓冲溶液保存柱子不好吧。
26楼2016-04-18 14:51:38
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锋子文

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
25楼: Originally posted by Van_zhu at 2016-04-18 11:05:55
反冲柱子是没有用的,有些柱子可能会冲塌。买根预柱或者改缓冲溶液吧!重新换柱子成本很高!

改缓冲盐就相当于改了方法,比较麻烦吧
27楼2016-04-18 16:10:11
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锋子文

铁虫 (小有名气)

目前排查:不进缓冲盐压力正常,进空白样压力也正常,进样后压力逐渐增加。单向阀已经超声过依然没有改善。。想不明白是什么原因。。
28楼2016-04-18 16:15:28
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Van_zhu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
27楼: Originally posted by 锋子文 at 2016-04-18 16:10:11
改缓冲盐就相当于改了方法,比较麻烦吧...

方法就是用来改进的,效率第一嘛!如果能找到经济适用的,不是更好吗!

发自小木虫Android客户端
碎碎念念的砖家
29楼2016-04-18 18:37:33
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sdzll

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
28楼: Originally posted by 锋子文 at 2016-04-18 16:15:28
目前排查:不进缓冲盐压力正常,进空白样压力也正常,进样后压力逐渐增加。单向阀已经超声过依然没有改善。。想不明白是什么原因。。

从你目前的排查来看,个人还是觉得流动相和样品间有问题。第一,你的初始比例下应该不会析出无机盐,但是不知到你的梯度最后有机相比例多高,如果有机相太高,无机盐肯定慢慢析出,所以你在使用过程中压力应该是不断上升的,而不是突然某一个样品造成压力升高。第二,样品溶剂是什么?溶解的样品在初始梯度下,会不会发生样品析出呢?如果是这样,也会引起压力慢慢上升的。
个人建议:1.如果怀疑流动相发生盐析,那么你就不进样品,空走梯度,一直运行几次,注意观察是否压力慢慢上升,如果没有变化,那么流动相体系应该是没问题。
2.如过你确认流动相体系没问题,那就判断一下样品是否会析出。运行梯度,只进空白溶剂,运行数针,观察压力变化。如果压力没有变化,那么你再运行样品,按照你的说法,这时候压力应该就会缓慢上升了。那么,这种情况下,很有可能就是样品原因了。
辰锦
30楼2016-04-22 19:37:57
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