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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » SDS聚丙烯凝胶电泳
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兽医小博士

铜虫 (初入文坛)

[求助] SDS聚丙烯凝胶电泳 已有2人参与

每次跑完电泳用考马斯G250染色 半个小时 脱色20分钟 换液脱色20分钟 此时胶背景还是蓝色，如果继续脱色，蛋白就都没有了 除了Marker什么都看不到，不知道是染色液还是脱色液的原因，上样加了20微左右 我用的染色液是异丙醇+冰乙酸+g250  甲醇+冰乙酸+g250二者都用过，请问各位大牛你们的Loading Buffer怎么配的，我配的5XBuffer颜色特别淡，感觉蛋白一直没表达出来 好像是这些溶液的配方有问题，求指点@biostar2009
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1楼 2016-04-11 22:16:35
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)
takara那本实验手册上有，我们是安那个来配的。不过你是用预染marker吧？如果排除其他原因，你可以换个非预染marker试试marker能否也脱掉。

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A right way maybe not a good way！
2楼2016-04-11 23:07:10
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jiayuan-jy

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

现在有直接卖的上样缓冲液，我用的5X 的，蛋白质的浓度在200mg/L的时候也能跑出来。
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3楼2016-06-20 15:27:05
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醉梦书香

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

考马斯亮蓝分两种，一种是G-250，一种是R-250，其中R-250是用来配制电泳染色液的，G-250是用来测蛋白含量的。（分光光度法）
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君子无欺，水任方圆
4楼2017-09-16 10:29:10
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小书生gg

新虫 (小有名气)
考马斯亮蓝用R250

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5楼2017-09-19 07:33:39
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