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qing227

金虫 (正式写手)

[求助] MTT实验的药物作用多长时间 已有1人参与

小虫在做MTT实验的时候查阅文献,只见多数文献直接将药物作用的时间定在24h、48h、72h,也有少数实验说因为细胞在48小时的时候为生长末期,我挺疑惑的,因为我觉得相同的细胞及使做了生长曲线,在接板培养这个过程中也很难控制是不是准确的生长末期,大家都是做了几次这种加药的生长抑制曲线才确定药物作用时间的呢?
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shake1984606

新虫 (初入文坛)

都是经验确定的,或者说是猜的。想准确定时间得用一些比较贵的仪器进行实时检测,一般来说得超有钱才舍得用

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2楼2016-04-25 09:52:20
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chenweijlu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

初步MTT筛选的话,一般都是24h,深入就要每隔12h测一次,最长到96h,一般细胞细选择较显著的都是48h,不是细胞生长末期的因素,是受细胞接种数量,和接种孔面积,培养基营养供给密度的影响,就是1孔板,按指导接种密度,大多数细胞系48小时都会覆盖85%以上,贴壁和悬浮细胞都一样,生长控制有你的对照组呢;还要考虑进一步考虑是否合适用MTT测,考虑换XTT,CCK-8其他的检测方法
3楼2016-04-25 11:25:16
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mlbiosci

新虫 (正式写手)

既然考虑时间,建议用cck8,对细胞基本无毒性,可以一直培养,到时间点测定。但是要想好做到读板时无菌,尤其是你长时间摸索条件

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4楼2016-04-25 22:22:16
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