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crisergioni

新虫 (初入文坛)

[求助] 求各位帮忙看看家兔α颗粒膜蛋白(GMP-140)含量测定的96孔板数据分析

由于实验做得比较久了,步骤原先没有记全,不清楚这些吸光度到底代表的是什么,希望大神能解答一下。当时做实验也比较水。。就是跟着步骤做了一次,对ELISA也不是特别了解,望大家能详细点解释~比如加一个样品是竖着加还是横着加,哪几个孔是代表同一样品的不同稀释浓度。真心都不懂。。
一下是96孔板的吸光度数据:
            1                  2                   3                     4                    5                    6                    7                   8                  9                    10           11                   12
A        1.345        0.034        0.031        0.032        2.76         2.597        2.248        0.998        0.706        0.315        0.034        0.034
B        1.327        0.035        0.032        0.033        2.141        2.607        2.251        1.174        0.705        0.317        0.034        0.044
C        1.365        0.032        0.033        0.032        2.672        2.572        1.385        0.729        0.315        0.313        0.034        0.035
D        1.333        0.465        0.56         0.199        0.54                 0.321         0.469        0.368        0.7                0.536        0.442       0.042
E        1.355        0.037        0.033        0.033        0.033        0.033        0.033        0.035        0.033        0.034        0.034        0.035
F        1.352        0.042        0.039        0.04                0.039        0.043        0.038        0.037        0.038        0.04            0.04          0.041
G        1.347        0.04          0.036        0.035        0.035        0.044        0.033        0.032        0.033        0.034        0.033        0.036
H        1.306        0.044        0.04          0.039        0.037        0.035        0.034        0.032        0.034        0.034        0.035        0.037

一下是加样步骤,其余的温育等省略了,步骤就只有这么点。。
1. 标准品的稀释
80 ng/ml        5号标准品        120 μL的原倍标准品加入120 μL标准品稀释液
40 ng/ml        4号标准品        120 μL的5号标准品加入120 μL标准品稀释液
20 ng/ml        3号标准品        120 μL的4号标准品加入120 μL标准品稀释液
10 ng/ml        2号标准品        120 μL的3号标准品加入120 μL标准品稀释液
5 ng/ml        1号标准品        120 μL的2号标准品加入120 μL标准品稀释液
2. 将原血浆作为样品1,浸润过止血材料的血浆为样品2
3. 加样:
(1)空白孔:只加显色剂A、B和终止液,其余相同。
(2)标准品孔:加入标准品50 ul,链霉素亲和素-HRP 50 ul。
(3)样品孔:加入样品40 ul,然后各加入抗GMP-140 抗体10 ul,链霉亲和素-HRP 40 ul,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37 ℃温育1 h。

这是得出的标准曲线

求各位帮忙看看家兔α颗粒膜蛋白(GMP-140)含量测定的96孔板数据分析
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求各位帮忙看看家兔α颗粒膜蛋白(GMP-140)含量测定的96孔板数据分析-1
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xq3927

木虫 (小有名气)

一1、般是最少做两个复孔,用手机打开的,提供的数据顺序有点乱,暂时不做解释。

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2楼2016-04-28 22:09:10
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xq3927

木虫 (小有名气)

3楼2016-04-28 22:09:48
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xq3927

木虫 (小有名气)

测完之后说明书上有没有计算公式,要按照你稀释的倍数去计算样品中GMP的含量。不是很习惯APP的打字,发的有点多,见谅!

发自小木虫Android客户端
4楼2016-04-28 22:12:55
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