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852058683

木虫 (知名作家)

[求助] 柱子有细缝,怎么办呢? 已有3人参与

做多糖的分离纯化,大家装2.6cm*100cm的柱子,柱材是sephacryl S-300 HR,有什么好经验没,装了好几次,用洗脱液洗脱(纯水),出现一两个5mm裂缝了,跪求建议?
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魔术

金虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
852058683: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-04-09 17:37:28
首先建议一下,现在各种数据传输很方便,可以求助的时候直接上图。
然后你试试湿法装柱。还有一个是不是洗脱液极性太大了?
早知道工作后这么难找对象,在学校就该好好恋爱,并且不分手。所谓的谈一场不分手的恋爱是多么美好的事啊!
2楼2016-04-09 15:18:28
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
852058683: 金币+10, 有帮助 2016-04-09 17:37:44
有能看见的裂缝,建议还是重装。
另外就是装柱时候注意两个问题:1.要充分浸泡填料,并且脱气。
2.装柱时候下方可以先放一部分溶液,然后缓慢倒入,最好有装柱器。
最好是自然沉降。然后再冲洗
3楼2016-04-09 16:44:03
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duliyu

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
852058683: 金币+10 2016-04-10 22:08:53
不懂,不过还是要说,如果你是在装住期间出现细缝的。那只能重装;如果是在洗脱过程中出现细缝的说明,你的洗脱剂洗脱剃度太大。有些极个别情况确实是不可避免细缝的(大孔树脂柱洗脱)一般这种凝胶柱不易出现细缝,

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守候之戒
4楼2016-04-09 22:06:19
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1004168358LU

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zinfly at 2016-04-09 09:44:03
有能看见的裂缝,建议还是重装。
另外就是装柱时候注意两个问题:1.要充分浸泡填料,并且脱气。
2.装柱时候下方可以先放一部分溶液,然后缓慢倒入,最好有装柱器。
最好是自然沉降。然后再冲洗

你好,我现在也在分离多糖,用的也是Sephacryl s-300 HR ,但是装上后流速好慢啊,几乎不流,有没有什么具体的装柱注意事项,跪求,谢谢
人生如戏,戏如人生
5楼2017-06-13 16:30:09
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852058683

木虫 (知名作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 1004168358LU at 2017-06-13 16:30:09
你好,我现在也在分离多糖,用的也是Sephacryl s-300 HR ,但是装上后流速好慢啊,几乎不流,有没有什么具体的装柱注意事项,跪求,谢谢...

你装的一般,流速可以到1.0.重新装吧

发自小木虫Android客户端
6楼2017-06-13 17:03:19
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 1004168358LU at 2017-06-13 16:30:09
你好,我现在也在分离多糖,用的也是Sephacryl s-300 HR ,但是装上后流速好慢啊,几乎不流,有没有什么具体的装柱注意事项,跪求,谢谢...

检查无填料时候,纯水的流速,如果还是很小,那就超声清洗柱头。
填料最好是用水泵,真空脱气1h。
一般会把流动相瓶子放在高处。或者是用恒流泵,增加压力,提高速度。
7楼2017-06-14 10:16:04
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桑庭vip

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 1004168358LU at 2017-06-13 16:30:09
你好,我现在也在分离多糖,用的也是Sephacryl s-300 HR ,但是装上后流速好慢啊,几乎不流,有没有什么具体的装柱注意事项,跪求,谢谢...

请问您是手动装柱的嘛?我装的Sephacryl  S-400也流的很慢,并且会流出填料。。。
8楼2018-03-20 11:11:33
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