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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 柱子有细缝，怎么办呢？
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852058683

木虫 (知名作家)

[求助] 柱子有细缝，怎么办呢？ 已有3人参与

做多糖的分离纯化，大家装2.6cm*100cm的柱子，柱材是sephacryl S-300 HR，有什么好经验没，装了好几次，用洗脱液洗脱（纯水），出现一两个5mm裂缝了，跪求建议？
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1楼 2016-04-09 09:49:31
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魔术

金虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
852058683: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-04-09 17:37:28
首先建议一下，现在各种数据传输很方便，可以求助的时候直接上图。
然后你试试湿法装柱。还有一个是不是洗脱液极性太大了？
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早知道工作后这么难找对象，在学校就该好好恋爱，并且不分手。所谓的谈一场不分手的恋爱是多么美好的事啊！
2楼2016-04-09 15:18:28
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
852058683: 金币+10, ★有帮助 2016-04-09 17:37:44
有能看见的裂缝，建议还是重装。
另外就是装柱时候注意两个问题：1.要充分浸泡填料，并且脱气。
2.装柱时候下方可以先放一部分溶液，然后缓慢倒入，最好有装柱器。
最好是自然沉降。然后再冲洗
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3楼2016-04-09 16:44:03
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duliyu

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
852058683: 金币+10 2016-04-10 22:08:53
不懂，不过还是要说，如果你是在装住期间出现细缝的。那只能重装；如果是在洗脱过程中出现细缝的说明，你的洗脱剂洗脱剃度太大。有些极个别情况确实是不可避免细缝的（大孔树脂柱洗脱）一般这种凝胶柱不易出现细缝，

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守候之戒
4楼2016-04-09 22:06:19
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1004168358LU

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zinfly at 2016-04-09 09:44:03
有能看见的裂缝，建议还是重装。
另外就是装柱时候注意两个问题：1.要充分浸泡填料，并且脱气。
2.装柱时候下方可以先放一部分溶液，然后缓慢倒入，最好有装柱器。
最好是自然沉降。然后再冲洗

你好，我现在也在分离多糖，用的也是Sephacryl s-300 HR ，但是装上后流速好慢啊，几乎不流，有没有什么具体的装柱注意事项，跪求，谢谢
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人生如戏，戏如人生
5楼2017-06-13 16:30:09
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852058683

木虫 (知名作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 1004168358LU at 2017-06-13 16:30:09
你好，我现在也在分离多糖，用的也是Sephacryl s-300 HR ，但是装上后流速好慢啊，几乎不流，有没有什么具体的装柱注意事项，跪求，谢谢...

你装的一般，流速可以到1.0.重新装吧

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6楼2017-06-13 17:03:19
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zinfly

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 1004168358LU at 2017-06-13 16:30:09
你好，我现在也在分离多糖，用的也是Sephacryl s-300 HR ，但是装上后流速好慢啊，几乎不流，有没有什么具体的装柱注意事项，跪求，谢谢...

检查无填料时候，纯水的流速，如果还是很小，那就超声清洗柱头。
填料最好是用水泵，真空脱气1h。
一般会把流动相瓶子放在高处。或者是用恒流泵，增加压力，提高速度。
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7楼2017-06-14 10:16:04
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桑庭vip

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 1004168358LU at 2017-06-13 16:30:09
你好，我现在也在分离多糖，用的也是Sephacryl s-300 HR ，但是装上后流速好慢啊，几乎不流，有没有什么具体的装柱注意事项，跪求，谢谢...

请问您是手动装柱的嘛？我装的Sephacryl  S-400也流的很慢，并且会流出填料。。。
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8楼2018-03-20 11:11:33
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