应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 网络生活区 » 有奖问答 » 学术帮助 » 怎么用ABI 2720设置TAIL-PCR程序
61/1返回列表
查看: 998  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

WhoKong

金虫 (小有名气)

[求助] 怎么用ABI 2720设置TAIL-PCR程序

请问有人做过TAIL-PCR吗？需要您的帮助，我有一台ABI 2720的PCR仪！不晓得怎么设置！还是根本不行？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-04-08 19:23:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufeiwaner

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
WhoKong: 金币+3, ★有帮助 2016-05-10 07:35:54
虫友你的实验怎么样了？我刚开始做TAIL PCR。看文献的样子，我也还有点迷糊。仪器设置应该很简单，循环结束再进行另一个循环就行。希望分享一下经验。
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1046/j.1365-313X.1995.08030457.x/full#opennewwindow
赞一下 回复此楼
2楼2016-04-28 00:30:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WhoKong

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yufeiwaner at 2016-04-28 00:30:23
虫友你的实验怎么样了？我刚开始做TAIL PCR。看文献的样子，我也还有点迷糊。仪器设置应该很简单，循环结束再进行另一个循环就行。希望分享一下经验。
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1046/j.1365-313X.19 ...

我已经会了，在一个循环插入多个温度就可以了。比如说
15个循环有9个温度：
94度30秒，68度30秒，72度2分钟。
94度30秒，68度30秒，72度2分钟。
94度30秒，44度30秒，72度2分钟。

显示屏上应该就是9Tmp,15Cycle。
赞一下 回复此楼
3楼2016-04-28 08:35:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufeiwaner

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by WhoKong at 2016-04-28 08:35:15
我已经会了，在一个循环插入多个温度就可以了。比如说
15个循环有9个温度：
94度30秒，68度30秒，72度2分钟。
94度30秒，68度30秒，72度2分钟。
94度30秒，44度30秒，72度2分钟。

显示屏上应该就是9Tmp,15C ...

嗯嗯，你用的是什么酶？不过仅仅这一步就是45个小循环，我听说高保真酶进行30个普通循环就够了，太多的话容易错配。你的产物出来没？测序结果如何？
赞一下 回复此楼
4楼2016-04-28 17:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WhoKong

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yufeiwaner at 2016-04-28 17:26:31
嗯嗯，你用的是什么酶？不过仅仅这一步就是45个小循环，我听说高保真酶进行30个普通循环就够了，太多的话容易错配。你的产物出来没？测序结果如何？...

LA酶，takarar 的。产物最好连在T载体上去测序。
赞一下 回复此楼
5楼2016-04-29 12:19:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufeiwaner

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的测序结果怎么样，克出来多少bp？我还在摸索。。。方便的话咱QQ聊，461858059
赞一下 回复此楼
6楼2016-05-13 13:05:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 WhoKong 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 19/950 2026-08-12 10:55 by 要乐观耀哥
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭