应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 网络生活区 » 有奖问答 » 学术帮助 » 怎么用ABI 2720设置TAIL-PCR程序
61/1返回列表
查看: 886  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

WhoKong

金虫 (小有名气)

[求助] 怎么用ABI 2720设置TAIL-PCR程序

请问有人做过TAIL-PCR吗？需要您的帮助，我有一台ABI 2720的PCR仪！不晓得怎么设置！还是根本不行？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-04-08 19:23:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufeiwaner

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
WhoKong: 金币+3, ★有帮助 2016-05-10 07:35:54
虫友你的实验怎么样了？我刚开始做TAIL PCR。看文献的样子，我也还有点迷糊。仪器设置应该很简单，循环结束再进行另一个循环就行。希望分享一下经验。
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1046/j.1365-313X.1995.08030457.x/full#opennewwindow
赞一下 回复此楼
2楼2016-04-28 00:30:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WhoKong

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yufeiwaner at 2016-04-28 00:30:23
虫友你的实验怎么样了？我刚开始做TAIL PCR。看文献的样子，我也还有点迷糊。仪器设置应该很简单，循环结束再进行另一个循环就行。希望分享一下经验。
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1046/j.1365-313X.19 ...

我已经会了，在一个循环插入多个温度就可以了。比如说
15个循环有9个温度：
94度30秒，68度30秒，72度2分钟。
94度30秒，68度30秒，72度2分钟。
94度30秒，44度30秒，72度2分钟。

显示屏上应该就是9Tmp,15Cycle。
赞一下 回复此楼
3楼2016-04-28 08:35:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufeiwaner

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by WhoKong at 2016-04-28 08:35:15
我已经会了，在一个循环插入多个温度就可以了。比如说
15个循环有9个温度：
94度30秒，68度30秒，72度2分钟。
94度30秒，68度30秒，72度2分钟。
94度30秒，44度30秒，72度2分钟。

显示屏上应该就是9Tmp,15C ...

嗯嗯，你用的是什么酶？不过仅仅这一步就是45个小循环，我听说高保真酶进行30个普通循环就够了，太多的话容易错配。你的产物出来没？测序结果如何？
赞一下 回复此楼
4楼2016-04-28 17:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WhoKong

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yufeiwaner at 2016-04-28 17:26:31
嗯嗯，你用的是什么酶？不过仅仅这一步就是45个小循环，我听说高保真酶进行30个普通循环就够了，太多的话容易错配。你的产物出来没？测序结果如何？...

LA酶，takarar 的。产物最好连在T载体上去测序。
赞一下 回复此楼
5楼2016-04-29 12:19:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufeiwaner

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的测序结果怎么样，克出来多少bp？我还在摸索。。。方便的话咱QQ聊，461858059
赞一下 回复此楼
6楼2016-05-13 13:05:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 WhoKong 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +5 77chaselx 2026-03-20 5/250 2026-03-20 23:42 by lovewei0727
[考研] 324求调剂 +5 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 5/250 2026-03-20 22:30 by 促天成
[考研] 316求调剂 +5 梁茜雯 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:26 by 你好你好666
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +3 ￣^￣゜汗 2026-03-19 4/200 2026-03-20 21:01 by zhukairuo
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 求调剂 +3 暗涌afhb 2026-03-16 3/150 2026-03-20 00:28 by 河南大学校友
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 307求调剂 +9 冷笙123 2026-03-17 9/450 2026-03-19 22:44 by 学员8dgXkO
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 材料，纺织，生物（0856、0710），化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭