24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2486  |  回复: 6

yiner

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因敲除 pk18无法在10%蔗糖板自杀

我现在在做青枯菌的基因敲除,自杀质粒用的是PK18,得到一次重组子之后,双抗板划线纯化后,单菌落涂布含10%surcose单抗板时,质粒总是掉不下来,尝试过将一次重组子于蔗糖液体培养基培养3代后再进行涂布10%surcose板,质粒仍掉不下来。  我已经卡在基因敲除这一步1年多了,再敲不掉就没法毕业了,如果有知道的同学能回复,感激万分。
回复此楼
fighting!!!!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)


2楼2016-04-08 21:23:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Ljch1121

新虫 (初入文坛)

你可以用载体上的抗生素抗性来筛选

发自小木虫Android客户端
3楼2016-04-11 22:41:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Ljch1121

新虫 (初入文坛)

4楼2016-04-11 22:41:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dd2531742233

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Ljch1121 at 2016-04-11 22:41:58
蔗糖自杀基因不可靠

我用还可以呀,效率还行
我的QQ719425242
5楼2016-07-15 17:35:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

su2008su11

木虫 (正式写手)

我想问一下,在得到第一次重组子的时候,用的是T4连接酶吗?供应商是哪一家。还有连接了多久,才做的转化。感激不尽
一命二运三风水四积阴德五读书
6楼2016-12-07 00:46:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenhuale

铜虫 (小有名气)

请问第二次同源重组(双交换)只能用蔗糖压力吗?像温敏的自杀质粒,能用高温来筛二次重组吗?

发自小木虫Android客户端
7楼2023-03-24 00:03:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yiner 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研求调剂 +3 ban班小七 2026-04-11 3/150 2026-04-11 20:48 by may_新宇
[考研] 303求调剂 +14 SereinQ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 20:43 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿085502,267分求调剂 +11 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 12/600 2026-04-11 11:08 by zhq0425
[考研] 生物学调剂 可调剂到生物与医药 +8 李政莹 2026-04-06 9/450 2026-04-11 10:36 by wwj2530616
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 298求调剂 +9 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 11/550 2026-04-11 09:35 by zhq0425
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385,求调剂 +8 Ezra_Zhang 2026-04-09 8/400 2026-04-11 09:15 by 猪会飞
[考研] 一志愿北理工298英一数二已上岸,感谢各位老师 +14 Reframe 2026-04-10 16/800 2026-04-10 23:07 by caotw2020
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 一志愿中南大学物理学,英一66,求调剂 +4 长烟旖旎 2026-04-08 5/250 2026-04-10 10:31 by 颖果儿
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-05 11/550 2026-04-10 09:32 by 钟洲2011
[考研] 278求调剂 +27 范婷娜 2026-04-07 31/1550 2026-04-09 20:49 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂材料科学与工程一志愿985初试365分 +5 材化李可 2026-04-08 5/250 2026-04-09 17:00 by Lilly_Li
[考研] 求调剂 +3 猪肉墩粉条cc 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:05 by 猪肉墩粉条cc
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +9 墨彧 yuyu 2026-04-06 9/450 2026-04-08 11:24 by 想读书的菌菌
[考研] 求调剂 +28 111623 2026-04-04 33/1650 2026-04-08 09:24 by 泽润东方
[考研] 材料调剂 +13 汉123456 2026-04-07 14/700 2026-04-07 22:53 by 来看流星雨10
[考研] 一志愿河北工业大学材料工程,初试344求专硕调剂 +6 15933906766 2026-04-05 6/300 2026-04-06 13:21 by 无际的草原
[考研] 工科370求调剂 +3 溏心煎鸡蛋 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:55 by 这是一个无聊的
信息提示
请填处理意见