24小时热门版块排行榜    

查看: 7578  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 求救,NEB的Q5高保真酶扩增出现问题 已有2人参与

各位大神,如题:我用普通的Taq酶扩增目的片段1.6Kb左右,可以扩出,且比较亮,但是下方有些非特异带。换用NEB的Q5高保真酶,同样的条件,就啥也没有了,体系和程序用的说明书推荐的;以前看过虫友遇到过这种问题,没想到今天自己也遇到了,想问问大家的都最后如何解决的啊?交流一下吧。郁闷啊
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by i760912798 at 2016-04-10 12:11:57
我用普通taq酶和高保真酶扩增过同一基因,退火温度完全不一样,你可以用高保真酶说明书上较低的退火温度扩增一下试一下!

好的,谢谢你的建议。
10楼2016-04-10 15:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lwk5716: 金币+5 2016-04-08 10:05:22
适当降低退火温度试试吧

发自小木虫Android客户端
2楼2016-04-07 23:36:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-04-07 23:36:23
适当降低退火温度试试吧

今天准备做个温度梯度试试,谢啦。
3楼2016-04-08 10:06:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-04-07 23:36:23
适当降低退火温度试试吧

我还想问您个问题,那就是有人说可以把普通Taq酶和高保真的酶混合起来扩增,可以提高效率,也能有保真性,您知道比例吗?可以这么干吗?扩出来的是加A尾巴的吗?
4楼2016-04-08 21:08:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +5 小小甜面团 2026-03-25 5/250 2026-03-26 21:10 by plmuchong
[考研] 329求调剂 +4 钮恩雪 2026-03-25 4/200 2026-03-26 20:53 by sanrepian
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料,材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 8/400 2026-03-26 20:34 by Higraduate
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 考研调剂 +8 小蜡新笔 2026-03-26 8/400 2026-03-26 16:18 by dick_runner
[考研] 材料与化工考研调剂 +10 孅華 2026-03-22 10/500 2026-03-26 15:40 by zzll406
[考研] 考研调剂 +7 呼呼?~+123456 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:24 by 小小麦片
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +9 Mr. Z 2026-03-25 9/450 2026-03-26 10:36 by baoball
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见