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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助，PCR产物有两个条带，而且都不亮，是引物出什么问题了？
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小李纸11

银虫 (正式写手)

[求助] 求助，PCR产物有两个条带，而且都不亮，是引物出什么问题了？ 已有1人参与

我用的特异性引物做的PCR，按理说应该是很亮的单条带，为什么我得到的是两条条带，而且都很浅。。。给老师看他说没有一条是目的条带，而且特异性不够，要升高退火温度，可是升高后还是原样。。。引物是目的基因的上下游取得，然后加了酶切位点和保护碱基，问题出在哪里了呢？
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1楼 2016-04-07 11:31:32
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sandycool

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小李纸11: 金币+8, ★有帮助 2016-07-04 14:05:42
有几个可能的原因，错配、模板污染或者是非特异性扩增

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2楼2016-04-07 12:27:36
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小李纸11

银虫 (正式写手)
那请问针对这几种情况我分别该怎么办呢？谢谢啦。。。

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3楼2016-04-07 13:17:51
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