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小李纸11

银虫 (正式写手)

[求助] 求助,PCR产物有两个条带,而且都不亮,是引物出什么问题了? 已有1人参与

我用的特异性引物做的PCR,按理说应该是很亮的单条带,为什么我得到的是两条条带,而且都很浅。。。给老师看他说没有一条是目的条带,而且特异性不够,要升高退火温度,可是升高后还是原样。。。引物是目的基因的上下游取得,然后加了酶切位点和保护碱基,问题出在哪里了呢?
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sandycool

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小李纸11: 金币+8, 有帮助 2016-07-04 14:05:42
有几个可能的原因,错配、模板污染或者是非特异性扩增

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2楼2016-04-07 12:27:36
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小李纸11

银虫 (正式写手)

那请问针对这几种情况我分别该怎么办呢?谢谢啦。。。

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3楼2016-04-07 13:17:51
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