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sunmaocai

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助 关于PCR

哪位大侠帮帮忙,我跑PCR跑不出我想要的条带,只要在MARKER的100bp以内有一条清晰的带,而我要的是1300bp的,做了好多回,也跑过梯度,结果还是一样,为什么啊?拜求!
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jbhu220

铁杆木虫 (职业作家)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-2 21:39
同意楼上的意见。但你跑的带很大,1300bp太大可能难以得到。不知道你跑的是不是SSR,若是自己设计的引物可能中间有内含子
6楼2008-10-22 20:29:48
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zjlxylw

铁杆木虫 (正式写手)

楼主说的什么意思啊?没看懂
你做的是什么试验啊?
2楼2008-10-22 14:23:11
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chenliang_0513

铁杆木虫 (职业作家)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-2 21:38
100bp?那是什么啊 ,引物二聚体还是应该1000bp以内?
引物没有设计好重新设计引物
或者你提高退火温度,可以减少非特意扩增
我本将心向明月,奈何明月照沟渠?
3楼2008-10-22 14:38:13
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helenfang

铜虫 (小有名气)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-2 21:39
楼上说的对,我也觉得100bp以内的可能是引物二聚体,得考虑下是不是引物设计错了
提高退火温度我估计没什么用,本来就没有目的片度了,提高了应该没有了吧我想
4楼2008-10-22 15:24:24
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