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张倩911011

金虫 (小有名气)

[求助] 单链DNA修饰金纳米粒子的紫外分析 已有2人参与

本人刚开始接触用单链DNA修饰金纳米粒子,紫外测试来看DNA的吸附和杂交。有一些关于紫外分析的问题请教大家:
1、DNA吸附后,谱图与AuNPs原图差距不大,最大吸收峰的变化不到1,特别小,这是正常现象么?或者同志们都是用什么方法来确定是否吸附上和吸附量的呢?有之前做过的小伙伴可以帮忙解释下吗?
2、盐浓度的测定时,峰位不会有太大移动,但半峰宽有比较大的改变。这个该如何解释呢?是不是不同盐浓度导致了纳米粒子稳定性的差异呢?
3、DNA杂交后的紫外最大吸收峰位置如何变化呢?

一定多多奖励金币,期待大神帮助,不甚感激。
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豆ating

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张倩911011: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-04-01 17:42:42
有没有DNA连接上,好像是看260nm处DNA的峰,连接上的话应该挺明显的;吸附量的话,方法很多吧,看过用荧光标记的DNA连接Au,然后用DTT将DNA解脱下来,看溶液中的荧光强度,跟标准曲线对应找到DNA的量;
keep calm and carry on
2楼2016-04-01 17:07:31
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小树苗旭儿

铁虫 (小有名气)

亲,你的金纳米粒子做的怎么样?为什么我们做的总是沉降了?就是在烧杯底部能明显看出来有金,而不是文献中说的红色溶液,这是为什么呢?可以交流一下么?
爱拼才会赢
3楼2016-04-09 10:03:48
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张倩911011

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 豆ating at 2016-04-01 17:07:31
有没有DNA连接上,好像是看260nm处DNA的峰,连接上的话应该挺明显的;吸附量的话,方法很多吧,看过用荧光标记的DNA连接Au,然后用DTT将DNA解脱下来,看溶液中的荧光强度,跟标准曲线对应找到DNA的量;

亲。我测了紫外,是有260的峰的。但是如何确定它是溶液内的DNA还是连接在金纳米粒子上的呢?
4楼2016-04-10 18:47:33
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邪恶的大肉丸

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
张倩911011(月牙儿的微笑代发): 金币+3, 谢谢参与~~ 2016-07-22 20:13:55
是否修饰成功可以用动态光散射表征一下水合半径
5楼2016-04-11 16:49:50
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ytianchina8391

金虫 (正式写手)

楼主你好!请教一下你测DNA-Au样品中DNA在260nm的吸收峰明显吗?我现在也在做DNA修饰Au的实验,吸收谱中只能看到一个非常不明显的吸收,所以也不确定是不是DNA修饰上去了没有.
6楼2016-09-08 01:46:30
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张倩911011

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ytianchina8391 at 2016-09-08 01:46:30
楼主你好!请教一下你测DNA-Au样品中DNA在260nm的吸收峰明显吗?我现在也在做DNA修饰Au的实验,吸收谱中只能看到一个非常不明显的吸收,所以也不确定是不是DNA修饰上去了没有.

挺明显的。 不过也跟加的DNA的量有明显的关系。我感觉520附近的峰比260的峰明显,而且有一个问题是260的峰无法确定是因为溶液中的DNA还是修饰在金上的DNA导致的
7楼2016-09-08 09:36:36
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ytianchina8391

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 张倩911011 at 2016-09-08 09:36:36
挺明显的。 不过也跟加的DNA的量有明显的关系。我感觉520附近的峰比260的峰明显,而且有一个问题是260的峰无法确定是因为溶液中的DNA还是修饰在金上的DNA导致的...

你可以离心呀?我的就是离心之后的样品,看着不是特别明显,离心之前吸收峰很明显。所以就怀疑可能没有修饰上。你是直接把DNA跟Au棒混合一段时间就行了吗,有没有别的处理呀?
8楼2016-09-08 11:30:43
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18316028367

新虫 (正式写手)

楼主你好,我刚入门这个方向,请问你的DNA修饰纳米金的详细步骤是什么呢?我看了很多文献都不太一样,都不知道要怎么办了。先谢谢楼主了!

发自小木虫Android客户端
9楼2016-12-14 23:17:12
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我的大大卷

新虫 (初入文坛)

连上dna的纳米金的紫外吸收从520nm移到524nm。盐浓度会影响连接到dna数目,有可能连接数目不均一,所以半峰宽变大
10楼2016-12-26 15:35:10
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