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梦想成真~

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物阴性对照总出带，与目的基因条带一样大小 已有2人参与

做敲除小鼠基因扩增，阴性对照出带，换了水，引物，以及Mix后还是出带，什么原因呀。做野生小鼠的结果就很好，对照没有问题，求帮助分析原因~

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1楼 2016-04-01 09:45:44
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fengliuyue

木虫 (正式写手)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-13 08:12:42
环境污染吧，气溶胶污染。彻底清洁下实验室吧，84消毒之类的
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2楼2016-04-01 10:57:08
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showhand

新虫 (初入文坛)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-13 08:12:51
我的也出现这个问题，最后发现是引物不好，建议换对引物，减少循环数再看一看，我先试一试

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3楼2016-09-12 20:12:01
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stqs0428

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-13 08:13:02
阴性对照是空白还是什么？基因组提取是否确认RNA去除干净？
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4楼2016-09-12 21:19:05
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yuy111

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-13 08:13:07
It is not clear from your question. Do you do PCR genotyping, and you got a target gene from a knock out mice?
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5楼2016-09-13 00:29:51
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梦想成真~

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yuy111 at 2016-09-13 00:29:51
It is not clear from your question. Do you do PCR genotyping, and you got a target gene from a knock out mice?

是的，我做的是基因分型，需要得到敲除型小鼠。

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6楼2016-09-28 11:17:55
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梦想成真~

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by stqs0428 at 2016-09-12 21:19:05
阴性对照是空白还是什么？基因组提取是否确认RNA去除干净？

阴性对照就是空白呀，只有水、引物等但是不加模板

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7楼2016-09-28 11:19:51
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梦想成真~

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by showhand at 2016-09-12 20:12:01
我的也出现这个问题，最后发现是引物不好，建议换对引物，减少循环数再看一看，我先试一试

以前就用的这种引物，没有问题呢。

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8楼2016-09-28 11:20:40
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梦想成真~

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fengliuyue at 2016-04-01 10:57:08
环境污染吧，气溶胶污染。彻底清洁下实验室吧，84消毒之类的

好的，我试一下，谢谢

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9楼2016-09-28 11:21:10
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