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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC基线突然跑不平了
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Ginee

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC基线突然跑不平了 已有6人参与

求助啊，用的是C18柱，之前一直好好的，这两天怎么都走不平基线，已经用各种冲法来排除系统和柱子进气泡的可能性了，流动相也都超声过了，并且柱压也很稳定，但是出来的峰就一直是这样，请问各位有经验的前辈，是哪里出问题了？

HPLC基线突然跑不平了


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1楼 2016-03-31 17:21:21
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hu_willie

新虫 (著名写手)
放太大了，你缩小下比率再给个截图看看，然后，有没有排除过是柱子和池子污染？

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4楼2016-03-31 17:56:13
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hu_willie

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by Ginee at 2016-03-31 20:28:32
柱子污染的话，应该柱压会一直增大吧，用乙腈冲了很久，然后还用甲醇：水=10：90也冲了很久，用甲醇冲完后，基线能跑平，但是换回流动相（水，乙腈，TFA）马上就又不平了，如果系统污染，应该也冲干净了呀。
...

不一定，柱子堵了才会柱压高。波长多少啊？

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8楼2016-03-31 21:10:44
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普通回帖

哆—啦

铁虫 (小有名气)
你左侧的刻度放的好小啊，之前也是这么小就能平吗？

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2楼2016-03-31 17:52:24
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棒妹儿

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看看紫外灯的能量，能量不足基线就不平。
要是能量足，那就请工程师来看看吧   也有可能是检测器里的样品池脏了
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3楼2016-03-31 17:55:03
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Ginee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 哆—啦 at 2016-03-31 17:52:24
你左侧的刻度放的好小啊，之前也是这么小就能平吗？

是呀，一般能到小数点后4位才认为它是平的。

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5楼2016-03-31 20:22:49
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Ginee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 棒妹儿 at 2016-03-31 17:55:03
看看紫外灯的能量，能量不足基线就不平。
要是能量足，那就请工程师来看看吧   也有可能是检测器里的样品池脏了

额？请问怎么看紫外灯的能量？

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6楼2016-03-31 20:23:16
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Ginee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hu_willie at 2016-03-31 17:56:13
放太大了，你缩小下比率再给个截图看看，然后，有没有排除过是柱子和池子污染？

柱子污染的话，应该柱压会一直增大吧，用乙腈冲了很久，然后还用甲醇：水=10：90也冲了很久，用甲醇冲完后，基线能跑平，但是换回流动相（水，乙腈，TFA）马上就又不平了，如果系统污染，应该也冲干净了呀。

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7楼2016-03-31 20:28:32
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Ginee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by hu_willie at 2016-03-31 21:10:44
不一定，柱子堵了才会柱压高。波长多少啊？
...

472nm，应该不会有溶剂峰的影响。。。

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9楼2016-03-31 21:54:36
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滴滴叭叭呜

金虫 (初入文坛)
我也用waters，个人理解，第一个柱压不正常，0.1毫升每分柱压到不了600

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10楼2016-04-01 12:37:28
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