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新手请教关于蛋白实验的基础问题
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先说下我要做的实验：将水凝胶负载蛋白质放到EP管里并加入PBS，37℃水浴。每隔一个时间点取出PBS，然后加入新的PBS。取出的PBS放入冻存管，低温保存，最后一起做ELISA。 然后问题来了： 1.以上实验步骤如做样品、取PBS等操作是不是都严格要求无菌？我现在具备的条件是能保证各种实验器具灭菌，水凝胶前体溶液可以滤菌。但是因为我暂时无法用到超净工作间，不能保证空气无菌。因为之前问到过其他的人，似乎蛋白质没有核酸那么脆弱，而且我没有用到培养基，PBS里面也基本不含有机物。那么究竟上述所有操作是不是都必须在超净工作台上进行？ 2.取出来的PBS保存应该是在-80℃深低温冰箱，如果用-190℃液氮罐保存行吗？或者先用液氮速冻，然后转移到-80℃冰箱可以吗？这种温度变化对蛋白活性有没有影响？ |
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