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新手请教关于蛋白实验的基础问题
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先说下我要做的实验:将水凝胶负载蛋白质放到EP管里并加入PBS,37℃水浴。每隔一个时间点取出PBS,然后加入新的PBS。取出的PBS放入冻存管,低温保存,最后一起做ELISA。 然后问题来了: 1.以上实验步骤如做样品、取PBS等操作是不是都严格要求无菌?我现在具备的条件是能保证各种实验器具灭菌,水凝胶前体溶液可以滤菌。但是因为我暂时无法用到超净工作间,不能保证空气无菌。因为之前问到过其他的人,似乎蛋白质没有核酸那么脆弱,而且我没有用到培养基,PBS里面也基本不含有机物。那么究竟上述所有操作是不是都必须在超净工作台上进行? 2.取出来的PBS保存应该是在-80℃深低温冰箱,如果用-190℃液氮罐保存行吗?或者先用液氮速冻,然后转移到-80℃冰箱可以吗?这种温度变化对蛋白活性有没有影响? |
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