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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 去除PCR产物中的模板
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i760912798

木虫 (正式写手)

[交流] 去除PCR产物中的模板 已有7人参与

可以用用第一次的PCR 产物，将其稀释1000倍后作为模板进行第二次PCR问题是直接用第二次的PCR产物转化，还需要胶回收第二次的PCR产物吗？
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1楼 2016-03-29 10:02:31
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王爱沫1

禁虫 (小有名气)
★
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2楼2016-03-29 10:07:19
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i760912798

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王爱沫1 at 2016-03-29 10:07:19
感觉不大懂你想表达的意思

敲除基因过吗

发自小木虫Android客户端
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3楼2016-03-29 10:08:48
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奋斗老青年
4楼2016-03-29 10:17:08
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tongyanna

金虫 (正式写手)
★
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无论用那个模板都一样，不知道你想干什么，如果想量上增加的话可以多次
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自己的路，自己快乐的走
5楼2016-03-29 10:17:30
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tongyanna

金虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
3楼: Originally posted by i760912798 at 2016-03-29 10:08:48
敲除基因过吗
...

敲除基因多是敲出个别基因片段吧
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自己的路，自己快乐的走
6楼2016-03-29 10:21:04
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sihaiming

铜虫 (初入文坛)
★
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可以加入DpnI酶消化模板，再者，你不需要胶回收吧，直接PCR产物回收就可以
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7楼2016-03-30 09:30:13
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原海亮

木虫 (著名写手)
★
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你这是在做质粒载体上的点突变么？

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
8楼2016-03-30 12:32:08
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)
★
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最好是回收之后，浓缩再电转

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9楼2016-03-31 08:23:50
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aquamarineqp

铜虫 (初入文坛)
★
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如果是连接转化的话，最好是胶回收，可以去除taq酶蛋白以及其他杂离子的影响，提高转化率。但是二次PCR不太好，扩增错误会成指数增长，直接用模板PCR胶回收就可以了。
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要学会生物统计
10楼2016-04-02 09:07:40
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